蛋壳膜多糖的提取及应用研究

来源 :哈尔滨商业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yunshan1990
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以废弃鸡蛋壳为原料,经超声波辅助盐酸浸泡法壳膜分离得到鸡蛋壳膜,使用双酶法、碱盐法和超声波辅助碱盐法对鸡蛋壳膜进行水解,大孔树脂吸附法纯化后得到蛋壳膜多糖纯化品。结合相关实验对纯化品的纯度、分子量及抗氧化性进行了研究,同时给出了一个蛋壳膜多糖功能饮料的配方。主要内容如下:(1)在单因素试验基础上,采用正交试验方法对超声波辅助盐酸浸泡法壳膜分离的工艺进行优化,得出最佳分离工艺参数为:盐酸用量20mL,超声时间45min,超声温度55℃,超声功率500W。在此条件下产率为4.206%,蛋壳残留率为0.23%。(2)在单因素试验基础上,分别采用正交试验方法和响应面法对双酶法、超声波辅助碱盐法和碱盐法提取蛋壳膜多糖进行了工艺优化,得出双酶法提取蛋壳膜多糖的最佳提取工艺为:木瓜蛋白酶酶解温度50℃,酶解时间2.3h,pH8.0,酶添加量4200U/g,胰蛋白酶酶解时间2.2h、酶解温度47℃、酶添加量3800U/g、pH8.7,在此条件下蛋壳膜多糖提取率为77.50%。超声波辅助碱盐法提取蛋壳膜多糖的最佳提取工艺为:液料比44:1mL/g、碱盐比12:1mL/mL、提取时间55min、提取温度60℃、功率500W,在此条件下,蛋壳膜多糖提取率为65.23%。碱盐法提取蛋壳膜多糖的最佳提取条件为:提取时间8h、提取温度65℃、碱盐比6:1 mL/mL、液料比15:1 mL/g,在此条件下,蛋壳膜多糖提取率为74.00%。将三种方法进行比较,确定采用双酶法提取蛋壳膜多糖可以取得较好的效果。(3)采用S-8型大孔树脂对粗蛋壳膜多糖进行分离纯化,研究了动态吸附和洗脱的四个因素,得到最佳的大孔树脂纯化条件为:上样液pH 7,上样量10mL,流速1 mL/min,在此条件下吸附率可达89.86%。洗脱液最佳pH值为9,此条件下解吸率为30.31%。(4)通过紫外光谱确定蛋壳膜多糖纯化品的最大吸收波长为250nm;凝胶过滤色谱测得硫酸软骨素标准品和蛋壳膜多糖纯化品的重均分子量分别为3137982和41006;通过高效液相色谱出峰时间及峰形确定本实验从鸡蛋壳膜中提取并纯化得到的物质为硫酸软骨素;使用高效液相色谱构建硫酸软骨素浓度和峰面积的标准曲线,最终计算得出硫酸软骨素纯化品浓度为89.51%。(5)以抗坏血酸为对照,研究蛋壳膜多糖纯化品的抗氧化性。蛋壳膜多糖纯化品对超氧阴离子自由基和羟自由基均有较强的清除能力,对DPPH自由基的清除能力稍弱,但三种自由基清除活性均小于同等浓度的抗坏血酸。(6)对蛋壳膜多糖功能饮料的工艺配方进行了研究。在蛋壳膜多糖的添加量为5mg/mL的基础上,最优配方为:木糖醇添加量6%,柠檬酸钠添加量0.15%,浓缩果汁添加量10mL。
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