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背景：白血病俗称血癌,其特征为白血病细胞在骨髓及其他造血组织中呈恶性、无限制地增生,浸润全身各组织和脏器,同时外周血中血细胞有量和质的变化(红细胞、血小板减少,白细胞明显增多或减少,常出现幼稚白细胞)。每天骨髓能产生上百亿个新的血细胞,大多数为红细胞。而白血病患者体内产出的白细胞比实际需要的多,且多数白细胞是不成熟的,即幼稚细胞,其存活期比正常细胞长。尽管这种白细胞数量很大,然而却不能像正常白细胞那样对机体具有防御作用。体内异常白细胞增多,会直接影响一些重要器官的功能,影响正常血细胞的产量、抑制红细胞和血小板的生成,临床上常有贫血、发热、感染、出血、肝脾或淋巴结不同程度肿大等表现。根据回顾调查,各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位,患者中男性多于女性。目前恶性肿瘤的治疗方法主要有化疗、放疗、器官移植、靶向治疗等。其中化疗是近年来在肿瘤治疗中进步最快的治疗方法,对于消灭远处转移或防止复发,有其独到之处。但是化疗药物常常“是非不清”、“敌我不分”,在杀伤肿瘤细胞的同时,也杀伤了人体正常细胞,如抑制骨髓造血系统的功能、脏器毒性、致畸致癌,最常见的呕吐、腹痛、腹泻等消化系统不适感。放疗适用病种少(主要用于中枢神经系统白血病、局部浸润、绿色瘤等),作用部位不精确,全身副作用大。骨髓和外周血干细胞移植受到了髓源、年龄、费用的限制。而靶向治疗作为近年来蓬勃发展起来的新兴治疗方法,给白血病病患者带来新的希望。靶向治疗是指根据肿瘤发病的特异性位点如蛋白酶活性异常、细胞内信号传导和凋亡异常、血管新生异常等,抗肿瘤药物靶向性地与其发生作用,以抑制酶的活性、阻断异常信号传导、抗血管新生、促进肿瘤细胞凋亡或分化,而对正常组织影响较小。已有研究显示低氧诱导因子(HIF-1α)可使VEGF、PDGF等血管新生因子的基因转录增加,促进血管新生,而我们前期的研究显示肿瘤抑制基因PTEN有抑制血管新生的作用,但PTEN对HIF-1α的表达是否有调控作用尚未见报道。目的：检测肿瘤抑制基因PTEN及低氧诱导因子(HIF-1α)在急慢性白血病中的表达水平,并探讨野生型PTEN基因对HIF-1α表达的影响。方法：1应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例健康人骨髓单个核细胞(MMNC)中PTEN.HIF-1αmRNA的表达,观察各组患者对治疗的反应性。2用携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)或空载体腺病毒(Ad-GFP),转染K562细胞系,观察转染PTEN基因后对HIF-1αmRNA表达的影响。结果：1PTEN.HIF-1αmRNA在髓系白血病中的表达水平及相互关系。1.1初治AML患者组PTEN mRNA表达水平(0.053±0.020)明显低于缓解期AML组(0.230±0.026)和正常对照组(NC组)(0.398±0.070),(P<0.01);CML-BC患者组PTEN mRNA表达水平(0.094±0.153)明显低于CML-CP患者组(0.757±0.161)和正常对照组(0.398±0.070),(P<0.01)；而CML-CP组与NC组比较同样存在显著性差异(P<0.05)1.2初治AML患者组HIF-1αmRNA表达水平(0.218±0.145)明显高于缓解期AML组(0.001±0.001)和NC组(0.001±0.001),(P<0.01);CML-BC患者组HIF-1αmRNA表达水平(0.265±0.060)明显高于CML-CP患者组(0.050±0.081)和NC组(0.001±0.001)(P<0.01);而CML-CP与NC比较同样存在显著性差异(P<0.05)。1.3Pearson直线相关法分析显示,白血病患者中PTEN mRNA与HIF-1αmRNA呈负相关(r=-0.5189,P<0.01)。1.4PTEN mRNA低表达组缓解率为24.0%(6/25),高表达组缓解率为60.0%(15/25),(P>0.05)；HIF-1αmRNA低表达组缓解率56.0%(19/25),高表达组缓解率36.0%(9/25),(P>0.05)；通过回顾性研究,经化疗完全缓解组在治疗前PTEN mRNA表达水平(0.053±0.050)高于未缓解组治疗前表达水平(0.040±0.038),(P<0.05)；而未缓解组治疗前HIF-1αmRNA的表达水平(0.324±0.173)高于缓解组治疗前表达水平(0.152±0.188),(P<0.05)。2腺病毒介导的野生型PTEN基因对K562细胞表达HIF-1α的影响。2.1分别在MOI为50、1 00、200时用Ad-PTEN-GFP或Ad-GFP转染K562细胞系,转染3天后,转染Ad-PTEN-GFP的K562细胞内PTEN水平(0.307±0.021)明显高于未作任何处理的K562细胞组(0.007±0.004)和AD-GFP转染组(0.010±0.005),(P<0.01)；而未作任何处理的K562细胞组和AD-GFP组无显著性差异(P>0.05)。2.2转染3天后,转染Ad-PTEN-GFP的K562细胞内HIF-1α水平(0.002±0.004)明显低于未作任何处理的K562细胞组(0.570±0.171)和AD-GFP转染组(0.585±0.235),(P<0.01)；而未作任何处理的K562细胞组和AD-GFP转染组无显著性差异(P>0.05)。2.3PTEN mRNA表达水平与HIF-1αmRNA表达水平呈负相关,相关系数为：r=-0.5715,P<0.01。结论：本课题组的前期研究结果证实野生型PTEN基因有抑制白血病血管新生的作用,本实验则进一步证实野生型PTEN可抑制HIF-1αmRNA的表达,这可能是PTEN抑制血管新生的机制之一。