火龙果抗旱相关MYB基因的克隆及表达分析

来源 :贵州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caoxiao771
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
干旱是人类面临的主要自然灾害,它影响植物生长和发育,从而使各种经济作物产量严重下降,是影响植物生长发育的最主要逆境因子之一。火龙果(Hylocereus undatus)在经济和生态上都有很高的价值,是近年来广泛关注的一种新兴热带亚热带果树,已成为贵州省喀斯特高温干旱地区正在开发的新、特、优农业项目。实验室已有研究表明,火龙果的抗旱基因资源尤其丰富。开展火龙果抗旱基因资源的挖掘,对于火龙果种质资源的保护和种质创新具有重要意义。本文以火龙果为材料,进行了抗旱相关MYB基因的克隆及其表达特性研究,主要结果如下:  1、RT-PCR克隆了火龙果泛素(UQT)基因和核糖体RNA基因(18s rRNA),其表达分析结果表明,此2基因表达稳定,表达量几乎不受外界因素的诱导,可作为内参基因研究火龙果逆境胁迫下基因的表达分析,分别将其命名为 HuUQT和Hu18s rRNA。  2、在Microarray数据的基础上,采用RT-PCR方法克隆了火龙果参与抗旱胁迫相关MYB基因片段(408 bp),命名为HuMYB。该基因编码的氨基酸与梅花(Prunus mume)PmMYB的相似性最高(64%)。  3、半定量 RT-PCR和荧光定量 PCR分析火龙果HuMYB在胁迫中的表达特性。研究表明,HuMYB的表达受干旱胁迫和低温胁迫的影响,在同种胁迫条件不同胁迫时间下的基因表达量存在差异。随着处理时间的增长,HuMYB在两种胁迫中的表达量均较 CK降低,在干旱胁迫下呈“上升-下降-上升-下降”的表达趋势,且在24 h和7 d表达最高,在20 d表达最低。而在低温胁迫下的表达持续降低,在两个火龙果种质(白肉品种和红肉品种)的表达均在48 h时明显降低,且在紫红龙中的表达量降低较明显。  4、采用荧光定量PCR技术,分析HuMYB、bHLH和GR在同一个干旱胁迫点不同种质中的表达特性。结果表明,这3个基因在5个种质(红龙果、红龙、B7、B4及紫红龙)中的表达均存在明显差异。HuMYB、bHLH在紫红龙中表达最高,在红龙中表达最低;GR在 B中表达最高,在红龙果、红龙、B7和紫红龙中表达无明显差异。从整体来看,三个基因之间,在火龙果种质中表达量最高的是GR,其次是HuMYB,表达量最低的是bHLH。三个基因在紫红龙中表达相对较高。  5、Real-time PCR分析结果表明了HuMYB与HuMYC在果实中表达存在明显差异,HuMYB的表达量随发育时间的增加而增加,且HuMYB在红肉20 d的表达水平最高,在白肉5 d中的表达水平最低;而HuMYC随白肉果实发育时间的增加而降低,随红肉果实发育时间的增加而降低,且在白肉20 d中表达最高,在红肉20 d中表达最低。  6、采用RACE克隆技术克隆HuMYB的全长,得到共2345 bp的基因全长序列,该基因完整开放阅读框ORF(Open Reading Frame)为1371 bp,编码456个氨基酸,分子量为52.9 kDa,理论等电点(PI)为6.4,为亲水性蛋白质,HuMYB蛋白的二级结构中占主导地位的是无规则卷曲。
其他文献
  本文对北京经济管理职业学院学生的体育锻炼现状进行了调查,并对其在中学和大学两个阶段的体育锻炼情况进行了对比。
  复原力是指一个人遭受挫折后,能够忍受和摆脱挫折的打击,在逆境中保持健康、正常的心理和行为能力。拓展训练在提高人承受压力、面对挫折的心理素质,加强人际沟通、团队协作
我国经济发展一直是资源高消费和粗放型增长模式,建筑能源浪费问题十分突出,建筑节能逐渐成为人们关注的焦点。屋面绿化作为建筑屋面节能的一种生态隔热模式,不仅能降低通过
粘滞阻尼墙是一种新型的用于建筑结构的耗能减震装置,能够为结构提供较大的阻尼力,能对结构进行较好的减振控制,并且该装置布置位置灵活,不影响建筑的正常使用功能等优点。1986年
  本文从羽毛球教学中教学方法的创新进行探讨,并对羽毛球技术动作中常被忽视又至关重要的"肘关节"的技术要点进行详细分析。
  文章运用比较分析法等研究方法,对中美高中体育教学目标进行比较分析,发现中美在教学目标设置上存在的差异,各有利弊。
洋流活动激烈的海域、沿海围垦区域的人工回填土和吹填土、河流三角洲冲积地带的土均可视为由砾石、砂、细粒土(粘土和粉土)等按某种比例混合而成的、具有内部结构的可液化混合
  精品教材是实现职业教育"能力本位"人才培养的重要工具,是教师组织教学的载体。教材不仅要有可读性,更要具备可操作性和服务实践的功能,才能满足职业教育发展的需求。本文从
  本文应用蒋家珍、周志辉等研发的"羽毛球技战术统计与分析软件",对郭振东/柴彪组合与李龙大/郑在成组合此前交手的三场比赛录像进行得失分的统计与分析,以期揭示郭振东/柴
  运动员作为一个特殊的群体,为北京市竞技体育发展作出了贡献,北京体育职业学院不但要保障在役运动员的文化学习和专项理论素质的培养,还要帮助运动员度过风华过后面临"二次