【摘 要】
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为了改善靶向治疗大肠癌的重组免疫毒素,本研究通过将抗癌胚抗原(serum carcinoembryonic antigen,CEA)纳米抗体和截短的铜绿假单胞菌外毒素(Pseudomonas aeruginosa exotoxi
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为了改善靶向治疗大肠癌的重组免疫毒素,本研究通过将抗癌胚抗原(serum carcinoembryonic antigen,CEA)纳米抗体和截短的铜绿假单胞菌外毒素(Pseudomonas aeruginosa exotoxin,PE)的融合成功制备出了具备安全、高效的新颖的重组免疫毒素。本研究为今后靶向治疗大肠癌的重组免疫毒素的应用打下了基础。本文先制备并筛选了一株特异性及亲和力比较好的抗CEA纳米抗体(11C12),接着将11C12与结构改造的PE毒素(PE40)构建重组免疫毒素原核表达载体,即pET28a-11C12/PE40,进而对融合蛋白进行诱导表达分离纯化。然后为了研究保护性纳米抗体的作用,又构建了在重组质粒pET28a-11C12/PE40的基础上增加了PE40的保护性纳米抗体2F2的重组质粒,即pET28a-11C12/PE40/2F2,进而对融合蛋白进行诱导表达分离纯化。最后将得到的上述两种融合免疫毒素做了大肠癌细胞的毒性验证。本研究制备出的两种重组免疫毒素对表达CEA的结直肠癌细胞均表现出明显的抑制作用。通过这两种免疫毒素对人正常结肠上皮细胞2950做细胞毒实验表明了保护性融合免疫毒素表现出了一定的保护作用。本研究为结直肠癌的治疗提供了一个新型,安全和高效的方法。
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