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直接灸法是有着数千年历史的中医针灸特色疗法之一,方法是将从艾草中提取的艾绒纤维做成米粒大小的小艾炷,然后放在选取的穴位上点燃,小艾炷燃烧会产生一定的热度,使施灸部位发生轻微的烧伤,可直接刺激穴位,起到温通阳气、疏通经脉、软坚散结、化癥止痛、活血祛瘀、促进新生、扶正祛邪等作用。近年来对直接灸法的研究发现,在防病治病方面,直接灸法能够提高人体的自身免疫功能,增强机体的抗病能力。在对肿瘤的治疗中发现,直接灸法可通过提高患者的自身免疫能力,促进癌细胞凋亡,抑制肿瘤的生长。现代一些中医专家运用直接灸法对防治原发性肝癌(Hepatic cellular cancer,HCC)的临床实验研究表明,直接灸对乙肝、肝硬化、HCC等确有防治作用。其中从医60余年,提倡"灸科学’"的承淡安先生的弟子谢锡亮先生,在实践中发现直接灸法对防治各类重型肝病疗效显著,并总结了多例直接灸防治HCC的临床验案。本研究在其基础上,以HCC成模期大鼠为研究对象,艾灸"肝俞穴"后,通过重点观察模型大鼠肝组织病理形态、肿瘤特异性生长因子(Tumor specific growth factor,TSGF)、凋亡抑制因子Livin的含量变化,深入探讨了直接灸"肝俞穴"防治HCC的效应及作用机理。目的本实验采用HCC成模期大鼠为研究对象,采用腹腔注射二乙基亚硝(Dieth ylnitrosamine,DEN)的方法建立大鼠病变模型。通过给予对象在肝俞穴上不同程度施灸治疗,观察直接灸肝俞穴对大鼠血清TSGF、肝组织中Livin的影响,探究直接灸肝俞穴对大鼠HCC发生发展的作用和机理。方法将70只雄性Wistar大鼠,采用随机数字表法分为空白组(10只)、HCC模型组(15只)、直接灸1组(15只)、直接灸2组(15只)及隔姜灸组(15只),其中,模型组、施灸组通过在腹腔部位注射DEN诱导产生HCC模型,方法为每周注射2次,以10周为期;从造模开始同时给予大鼠施灸肝俞穴进行干预,具体为:3壮/直接灸1组,6壮/直接灸2组,3壮/隔姜灸组,每隔一天施灸1次,以10周为期。空白组无治疗。待造模完成,先大鼠尾静脉采血后,在大鼠腹腔注射10%的水合氯醛溶液麻醉,进行取肝组织检测。称肝质量,计算肝指数;用HE染色法,对大鼠肝脏的病理形态学进行观察;ELISA法检测血清TSGF,免疫组化法检测Livin在肝组织中的表达情况。结果1.肝组织病理形态学变化:HE染色显示,模型组,肿瘤灶诱导形成,小叶结构完全破坏,核/质比增大,细胞核深染,异型性增加,肝细胞坏死;直接灸1组,核/质比略增大,癌细胞数量较少,细胞核异型性低,有少量结节形成;直接灸2组,细胞核深染、核/质比增大,肝细胞有双核;隔姜灸组,细胞核深染、核/质比略增大,未发现结节。空白组肝细胞的形态正常,肝排列、肝小梁均没有异常变化。2.血清TSGF的表达情况:造模结束后,与空白组相比,模型组TSGF含量均显著增高(P<0.05);与模型组相比,直接灸1组、直接灸2组TSGF含量无显著性改变(P>0.05),但有降低趋势;与模型组相比,隔姜灸组TSGF含量均显著降低(P<0.05)。3.肝组织中Livin表达情况:造模结束后,与空白组相比,模型组、施灸组Livin表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,直接灸1组Livin表达均有降低趋势,但无显著性改变(P>0.05);直接灸2组和隔姜灸组Livin表达均明显降低(P<0.05)。结论1.本实验所用的HCC大鼠模型是通过在其腹腔注射DEN的方法获得,所采用的造模方法可靠。2.在肝俞穴上直接灸和隔姜灸治疗方法对HCC模型大鼠可改善肝脏病理形态,减轻细胞癌变程度。但直接灸法和隔姜灸法改善程度无明显差异3.直接灸肝俞穴和隔姜灸可有效降低血清TSGF,肝组织中Livin的表达水平。4.直接灸肝俞穴对HCC模型大鼠的发生具有一定的预防作用,其能延缓癌变进程,但不能完全阻止,由此认为:直接灸肝俞穴可以下调血清TSGF,肝组织中Livin的表达水平,与抑制癌变细胞的形成有关。