脂质体介导hALR转染绵羊胎儿成纤维细胞的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:info1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以脂质体介导法转染绵羊胎儿成纤维细胞(sFFCs),寻找影响脂质体介导转染sFFCs效率的因素,以期提高转染效率,为转基因绵羊生物反应器打下基础。 首先成功建立了30天绵羊胎儿成纤维细胞培养体系及优化的转染方法,在此基础上sFFCs能传代至F<,30>,pNIGBA质粒转染率可达到46%。根据建系要求,对sFFCs的生物学性状进行分析结果如下: 1.培养细胞形态为典型的成纤维状,可根据对胰蛋白酶的敏感度不同,将其纯化。 2.绵羊胎儿成纤维细胞的生长曲线均呈“S”型,细胞经历了潜伏期、指数生长期和平台期。 3.细胞冷冻实验结果显示,绵羊胎儿成纤维细胞用DMSO(10%)冷冻,细胞存活状态良好,说明本研究中所采用冷冻保护剂适合于sFFCs的长期冷冻保存。 4.染色体核型分析绵羊的二倍体染色体数目为2n=54,在本研究培育体系中能保持二倍体性状,遗传性状稳定,可以使绵羊遗传资源在细胞水平长久保持下来。 5.LipofectamineReagent能有效介导pNIGBA质粒转染sFFCs,绿色荧光蛋白基因在培养细胞中的表达,转染效率与细胞汇合度、质粒DNA和脂质体的浓度比例、转染时间及G418浓度相关。实验中当细胞汇合度达到30%~60%时,用3.0μl脂质体介导1.0μg质粒DNA转染5h,再用G418(800μg/ml)筛选一到两周即可获得满意的转染效率,转染率可达到46%。
其他文献
目的:评价在膝关节损伤中核磁共振(MRI)的诊断效果.方法:入选58例膝关节损伤患者.根据检查方法分组,为CT组(30例)和MRI组(28例).分析两组的诊断正确情况.结果:CT组诊断正确率
同其他事物一样,在诗歌史上,四言诗也经历了由盛而衰的过程。东晋末年诗歌向着“庄、老告退、山水方滋”的方向一直发展,并且出现了像陶渊明这样的诗人,使此时的诗歌艺术出现
目的:探究西酞普兰联合舒必利在治疗伴精神病性症状抑郁发作上的效果.方法:通过选取2014年1月-2016年1月期间收治的伴精神病性症状抑郁发作患者80例(之前在肥城矿业中心医院
乳化炸药以其抗水性能、爆炸性能、安全性和原料来源广泛、环境污染少等特点,在我国迅速发展。随着应用范围的不断扩大,对其品种性能及生产设备提出更多要求。BME系列乳化粒
目的:探究急性胆囊炎患者的围手术期护理措施.方法:选取我院2013年8月-2015年6月收治的急性胆囊炎患者37例,对患者采取精心的围手术期措施.结果:本组37例患者在治疗的同时采
目的:观察针对性护理在小儿肺炎护理中的临床效果.方法:选择2015年6月-2016年6月我院收治的150例小儿肺炎患者作为研究对象.对照组小儿肺炎患者使用传统常规护理方法进行系统
假如一棵果树光开花,不结果,果农会把它砍掉当柴烧。同样,一项投资巨大、经过科技人员呕心沥血研制出来的科技成果,如果得不到应用、推广,就会失去存在的价值。据报载,1990
本文通过对荣华二采区10
期刊
目的:观察硝苯地平联合卡托普利舌下含服对高血压急症的降压效果.方法:将我院收治的高血压急症患者143例随机分为三组,A组予以卡托普利片,B组予以硝苯地平缓释片,C组予以卡托
目的:提高宫腔镜检查手术成功率,减少并发症的发生.方法:对383例宫腔镜检查手术患者的临床资料及其术后并发症情况作详细分析.结果:无一例并发症发生.结论:熟练的手术护理配