目的:观察清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠GFAP、NeuN表达水平的影响,探讨清脑益元汤保护脑缺血损伤神经元的部分作用机制。方法:选取雄性健康SD大鼠112只,体重250±50g,用随机数字表法将大鼠分为4组:空白组(7只)、假手术组(35只)、模型组(35只)、清脑益元组汤(35只)。假手术组、模型组、清脑益元汤组分别按照术后取材时间点1d、3d、7d、14d、28d又分为5个亚组。空白组大鼠正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;假手术组大鼠颈动脉插入约8mm线栓,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;模型组术前灌胃等体积蒸馏水7d,大鼠麻醉后行MCAO术,制成大鼠急性脑缺血损伤模型,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;清脑益元组大鼠术前灌胃等体积清脑益元汤7d后行MCAO术,灌胃清脑益元汤。参考Longa 5级4分法对大鼠脑缺血损伤后神经功能缺损症状评分,按照各取材时间点进行标本采集。大鼠脑组织取材后,应用TTC染色法对大鼠脑梗死体积进行检测;TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡数量;免疫组织化学法检测脑缺血损伤大鼠梗死区GFAP、NeuN阳性细胞数的变化情况。结果:(1)神经功能缺损评分情况:与假手术组相比,模型组及清脑益元汤组大鼠神经功能缺损评分有显著性差异(P<0.01);与模型组相比较,在同一时间点清脑益元汤组大鼠神经功能缺损症状均有不同程度的改善,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)TTC染色法检测脑梗死体积:空白组及假手术组未见白色梗死灶,模型组及清脑益元汤组大鼠均可见脑组织白色梗死灶;与模型组比较,清脑益元汤组大鼠脑梗死面积明显减小(P<0.05)。(3)TUNEL法检测细胞凋亡状况:与假手术组相比,模型组与清脑益元组凋亡细胞阳性表达在各取材时间点均明显上升(P<0.05);与模型组比较,清脑益元组凋亡细胞在各个取材时间点的表达均明显减少,TUNEL阳性反应物光密度值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化法检测结果:空白组及假手术组大鼠脑组织中可观察到少量GFAP免疫阳性细胞的表达,大量NeuN阳性细胞表达;与假手术组比较,模型组与清脑益元组在相同时间点GFAP免疫阳性细胞的表达均明显增多,NeuN阳性细胞表达偏少,具有明显差异性(P<0.05);GFAP表达于7d达到高峰后下降,与模型组同一取材时间点相比较,清脑益元汤组GFAP表达明显减少,NeuN阳性细胞数显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠神经元具有保护作用,其作用机制可能与下调GFAP的表达水平,上调NeuN的表达水平有关。