本实验对重组大肠杆菌BL21(DE3)表达重组新型溶栓酶(new thrombolytic agent，NTA)的发酵条件进行了研究，改进其发酵生产工艺，提高NTA的表达，为下一步的工业化生产打下基础。 经研究发现，通过改变诱导剂IPTG浓度、诱导时间、添加锌离子，以及在发酵培养基中组合添加乳糖等方法，可以提高外源蛋白的表达效率。种子摇瓶选择培养7～8小时后，以3％的接种量接入发酵培养基较为理想。诱导时机选择菌体OD600接近4.0，其诱导的效果最佳，最终的蛋白的产量相对于对照组提高了15％。相同培养条件下，采用乳糖诱导效果明显低于IPTG，其蛋白表达仅为IPTG诱导时蛋白表达的40％，所以采用1.5 mmol/L的IPTG浓度进行诱导6小时。在相同培养条件下，在培养基中加入1.0 g/L的ZnCl2后，外源蛋白的表达程度较空白组提高40％，发酵最终结果较空白对比组提高了29.8％。以IPTG作为诱导剂，同时在培养基中组合加入微量的乳糖，可以使外源蛋白的表达效率提高10％～15％。 使用响应面设计软件Design-Expert Version7.0.0对蛋白胨、酵母膏、葡萄糖浓度等影响因素进行最优化处理。拟合最终菌体密度OD600(Y1)、每克干菌体中的NTA含量(Y2)、每升发酵液中NTA含量(Y3)与其的关系方程。通过分析发现，较高的蛋白胨和葡萄糖浓度有利于最终菌体密度的上升，优化后相对优化前菌体浓度最高提高了近15％。蛋白胨和酵母膏比例接近1时最有利于外源蛋白表达，优化后相对优化前外源蛋白表达最高提高了近25％，优化后相对优化最终发酵结果提高了近20％。