长白白眉蝮蛇蛇毒中纤溶酶原激活剂的研究

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纤溶酶原激活剂可以激活体内的纤溶酶原生成纤溶酶,溶解纤维蛋白,达到溶栓目的。蛇毒类纤溶酶原激活剂由于其半衰期长、出血副作用小,具有很好的开发前景。 本试验以长白白眉蝮蛇蛇毒为原料,通过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、Sephadex G-75凝胶层析、Lysine SepharoseTM 4B层析得到蛇毒纤溶酶原激活剂。经SDS-PAGE凝胶电泳和HPLC检验均呈现单一组分;经SDS-PAGE凝胶电泳测得分子量为32kD,等电聚焦电泳测得等电点为4.82,此蛋白由一条肽链组成;硫酸-苯酚法和PAS法证明其不含糖基,原子吸收光谱法测得每摩尔纯蛋白含有5摩尔锌;精氨酸酯酶活力测定其不具有精氨酸酯酶活性,纤维蛋白平板法测定其不具有纤溶酶活性而具有专一的纤溶酶原激活剂活性,出血毒测定结果表明纯品没有出血毒活性,发色底物短肽S-2238证明酶作用于精氨酸羧基形成的酰氨键,丝氨酸蛋白酶抑制剂和金属离子螯合剂可以抑制酶活性,它只作用于纤维蛋白原的α链和β链;酶反应最佳温度为60℃,最佳pH值为8,活性不被血浆蛋白酶抑制因子所抑制,这些酶学及生物学性质的测定给以后的药理学评价研究奠定了基础。 本研究表明,在长白白眉蝮蛇中筛选纤溶酶原激活剂是可行的,纯化得到的纤溶酶原激活剂蛋白可能成为一种新型的溶栓类药,进一步的实验正在进行中。
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