本研究以布鲁氏菌(Brucella)基因组编码31kDa核周质蛋白的BCSP31基因设计了布鲁氏菌属荧光定量PCR特异性引物和Taqman荧光探针,优化了荧光定量PCR反应体系和条件,建立了布鲁氏菌属荧光定量PCR检测方法,组装了布鲁氏菌属检测试剂盒。采用该方法和检测试剂盒可检测所有布鲁氏菌,包括相应的种和生物型。在建立布鲁氏菌属荧光定量PCR检测方法的基础上,根据布鲁氏菌基因组多拷贝插入元件IS711及其下游多态位点,设计了检测牛、羊、猪种布鲁氏菌的引物和牛、羊、猪种特异性荧光探针,优化了牛、羊、猪种布鲁氏菌荧光定量PCR反应体系和条件,建立了牛、羊、猪种布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法,组装了牛、羊、猪种布鲁氏菌检测试剂盒,该方法能特异检测上述3个种的布鲁氏菌。上述荧光定量PCR方法和检测试剂盒能对15～75fg的布鲁氏菌基因组DNA进行检测。具有高度敏感性和特异性,同时采用本研究建立的检测方法对模拟样本和全血样本进行了检测,证明本方法可用于污染样和临床样本的检测。