基于中国鸡蛋过敏人群的主要致敏原表位定位研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JIABUTUO
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鸡蛋是导致婴幼儿和儿童过敏的主要过敏食物之一,鸡蛋过敏在5岁以下儿童中的发生率约为2%。鸡蛋过敏的物质基础是致敏原的致敏性表位。表位又称抗原决定簇,是致敏原中与抗体结合或被细胞表面受体识别,并诱导免疫反应的特殊化学基团。表位按照空间结构可分为线性表位和构象表位,按照表位识别受体细胞的不同可分为T细胞表位和B细胞表位。由于加工对致敏原空间结构的改变,构象表位比线性表位更易被破坏。B细胞表位是可被B细胞表面受体或B细胞分泌的抗体特异性识别并相互结合的表位。在过敏反应中,两类B细胞线性表位很重要,即B细胞IgG和IgE线性表位。此外,表位具有特异性,研究人群的不同,其表位鉴定结果会有所差异。因此,定位出针对中国人群的鸡蛋致敏原B细胞线性表位对深刻认识中国人群鸡蛋过敏具有重要意义。目前针对中国鸡蛋过敏患者进行的卵转铁蛋白表位定位已经开展,其余3种鸡蛋蛋清中的主要致敏原表位尚待鉴别。本研究通过生物信息学技术对鸡蛋卵类粘蛋白、卵白蛋白和溶菌酶的B细胞线性表位进行预测,并基于中国鸡蛋过敏人群采用肽扫描定位技术鉴定3种蛋白的B细胞线性表位,而且进一步鉴定了溶菌酶致敏原的主要表位,主要研究方法、结果和结论如下:(1)使用DNAStar、Immunomedicine Group、BepiPred、Bcepred和ABCpred五种生物信息学工具分别对3种鸡蛋致敏原的氨基酸序列进行解析,预测其潜在的B细胞线性表位。通过综合分析,预测出6个卵类粘蛋白B细胞线性表位,分别为AA8~32(FPNATDKEGKDVLVCNKDLRPICGT)、AA52~58(TNISKEH)、AA66~90(VPMNCSSYANTTSEDGKVMVLCNRA)、AA102~104(YDN)、AA113~144(VEQGASVDKRHDGGCRKELAAVSVDCSEYPKP)和AA148~161(AEDRP LCGSDNKTY)。预测出14个卵白蛋白B细胞线性表位,分别为AA42~45(VYL G)、AA47~51(KDSTR)、AA58~60(VRF)、AA70~78(IEAQCGTSV)、AA92~99(TKPNDVYS)、AA110~124(ERYPILPEYLQCVKE)、AA140~142(DQA)、AA151~154(ESQT)、AA158~168(IRNVLQPSSVD)、AA188~194(AFKDEDT)、AA199~208(FRVTEQESKP)、AA264~269(KLTEWT)、AA272~278(NVMEERK)和AA287~296(KMEEKYNLTS)。预测出4个溶菌酶B细胞线性表位,分别为AA18~21(DNYR)、AA39~51(NTQATNRNTDGST)、AA62~78(WWCNDGRTPG SRNLCNI)和AA109~117(VAWRNRCKG)。(2)利用间接ELISA筛查了78个中国人群鸡蛋过敏患者血清样本的特异性组分抗体,筛查出的s IgE阳性率分别为卵类粘蛋白38.4%(30/78)、卵白蛋白47.4%(37/78)、卵转铁蛋白30.7%(24/78)和溶菌酶46.1%(36/78),s IgG阳性率分别为卵类粘蛋白88.4%(69/78)、卵白蛋白89.7%(70/78)、卵转铁蛋白64.1%(50/78)和溶菌酶78.2%(61/78)。(3)根据肽扫描定位原理,利用斑点杂交法筛选出与卵类粘蛋白过敏患者血清池中IgE和IgG特异性结合的多肽片段,定位出卵类粘蛋白的9个B细胞IgE线性表位和4个IgG线性表位。其中,9个B细胞IgE线性表位分别为AA6~16(SRFPNATDEKG)、AA15~22(KGKDVLVC)、AA24~34(KDLRPICGTDG)、AA33~43(DGVTYTNDCLL)、AA48~58(IEFGTNISKEH)、AA75~85(NTTSED GKVMV)、AA84~94(MVLCNRAFNPV)、AA123~133(HDGGCRKELAA)和AA171~181(VVESNGTLTLS),4个B细胞IgG线性表位分别为AA75~85(NTTS EDGKVMV)、AA84~94(MVLCNRAFNPV)、AA144~154(PDCTAEDRPLC)和AA174~184(SNGTLTLSHFG)。在这两种表位中,AA75~85(NTTSEDGKVM V)、AA84~94(MVLCNRAFNPV)和AA174~181(SNGTLTLS)为它们共有的表位。另外,AA75~85是IgG线性表位中未见报道的新表位。(4)根据肽扫描定位原理,利用斑点杂交法筛选出与卵白蛋白过敏患者血清池中IgE和IgG特异性结合的多肽片段,定位出卵白蛋白的4个B细胞IgE线性表位和4个IgG线性表位。其中,4个B细胞IgE线性表位分别为AA84~91(LRDILNQI)、AA129~139(GLEPINFQTAA)、AA213~220(YQIGLFRV)和AA360~370(RADHPFLFCIK),4个B细胞IgG线性表位分别为AA27~37(NIFYC PIAIMS)、AA72~82(AQCGTSVNVHS)、AA291~301(KYNLTSVLMAM)和AA360~370(RADHPFLFCIK)。在这两种表位中,AA360~370(RADHPFLFCIK)为它们共有的表位。另外,AA84~91、AA213~220和AA360~370是IgE线性表位中未见报道的新表位,AA27~37、AA72~82、AA291~301和AA360~370是IgG线性表位中未见报道的新表位。(5)根据肽扫描定位原理,利用斑点杂交法筛选出与溶菌酶过敏患者血清池中IgE和IgG特异性结合的多肽片段,定位出溶菌酶的7个B细胞IgE线性表位和6个IgG线性表位。其中,7个B细胞IgE线性表位分别为AA3~13(FGR CELAAAMK)、AA18~22(DNYRG)、AA30~34(CAAKF)、AA63~73(WCNDGRT PGSR)、AA75~79(LCNIP)、AA84~91(LSSDITAS)和AA115~117(CKG),6个B细胞IgG线性表位分别为AA3~13(FGRCELAAAMK)、AA31~36(AAKFE S)、AA57~64(INSRWWCN)、AA75~79(LCNIP)、AA88~93(ITASVN)和AA115~117(CKG)。在这两种表位中,AA3~13(FGRCELAAAMK)、AA31~34(AAKF)、AA75~79(LCNIP)、AA88~91(ITAS)和AA115~117(CKG)为它们共有的表位。另外,AA30~34和AA84~91是IgE线性表位中未见报道的新表位,AA3~13、AA31~36、AA57~64、AA75~79、AA88~93和AA115~117是IgG线性表位中未见报道的新表位。(6)根据肽扫描定位原理,使用10个溶菌酶过敏患者血清样本,利用斑点杂交法分别筛选出与单个血清样本中IgE和IgG特异性结合的多肽片段,定位出溶菌酶的3个主要B细胞IgE线性表位和2个IgG线性表位。其中,3个主要B细胞IgE线性表位分别为AA24~34(SLGNWVCAAKF)、AA81~91(SALLS SDITAS)和AA102~112(GNGMNAWVAWR),2个主要B细胞IgG线性表位分别为AA30~37(CAAKFESN)和AA84~94(LSSDITASVNC)。在这两种主要表位中,AA30~34(CAAKF)和AA84~91(LSSDITAS)为它们共有的表位。(7)使用Bioedit软件预测溶菌酶的主要B细胞线性表位中的关键氨基酸。预测出了21个IgE线性表位中的关键氨基酸,分别为24S、25L、28W、29V、31~32A、34F、81S、82A、83~84L、85~86S、90A、91S、105M、107A、108W、109V、110A和111W。预测出了6个IgG线性表位中的关键氨基酸,分别为34F、35E、36S、85~86S和91S。总之,本论文使用中国鸡蛋过敏患者血清较全面解析了鸡蛋清中主要致敏原卵类粘蛋白、卵白蛋白和溶菌酶的IgE和IgG线性表位以及溶菌酶的主要表位,填补了国内空白,为进一步深刻理解鸡蛋致敏原结构与致敏性提供了重要的信息。
其他文献
我国食品专用油脂的市场前景广阔,氢化油脂因其加工优越性在食品专用油脂中被广泛应用,但是氢化过程容易产生反式脂肪酸,对人类身体健康危害较大。目前市面上的食品专用油脂的组成多以长碳链饱和脂肪酸为主,长期过量食用富含长碳链油脂的食物会引发超重、肥胖、糖尿病和心血管疾病等代谢性疾病。此外,现有的大多数食品基料油存在亚油酸含量多,亚麻酸含量极少,亚油酸亚麻酸比例失衡等问题。因此,有必要开发具有低热量、营养性
学位
甲壳素是一种天然、无毒和可再生多糖聚合物,含有丰富的N-乙酰基。甲壳素通过高温煅烧可使氮元素均匀地分布在碳环中,从而生成新型的N-掺杂甲壳素功能材料。因此,本论文在“碳中和”背景下,利用生物质化合物甲壳素分别制备氮掺杂磁性甲壳素碳球(NMCMs)和氮掺杂磁性多孔甲壳素二氧化钛碳球(NMCMs@TiO2),并分别作为新型的吸附剂和光催化降解材料,实现对姜黄素高效吸附包埋和对污染物甲基橙(MO)的高效
学位
氨(NH3)是重要的化学基础原料,制药工业、食品工业及基本化学工业等其他工业的发展都离不开氨产业这一重大支柱,氨在全球经济发展中发挥着不可替代的作用。现代合成氨技术依赖Haber-Bosch工艺利用氢气和氮气在高温高压条件下施加催化剂合成NH3,在合成氨驰放气过程中,仍有3%-6%的NH3与其他气体混合逃逸,这不仅造成氨资源浪费,也对环境产生一定的威胁,如部分PM2.5就是由于工业尾气中的NH3与
学位
随着进入21世纪20年代,世界局势进入一个新的发展阶段。全球围绕能源的开发与竞争日渐激烈,以至于现在油价飙升,许多燃油车车主发出“95加满,倾家荡产”的无奈,这使得继续发展动力电池汽车成为了迫切需求。另一方面,随着3C电子设备的迅猛发展和未来智能化社会的需求,对便携式电池等储能设备的提出了更高的性能要求。因此,需要发展大容量、长续航、可快速充放电、安全廉价的电池以满足未来人们对储能设备的需求。锂硫
学位
工业技术的不断发展使得能源需求显著增加,然而燃煤电厂等大量污染物的排放给当今社会带来严峻的环境问题。二氧化硫(SO2)是煤炭燃烧后排放的烟道气中的主要污染气体之一,能够在大气层与水汽结合形成酸雨,从而对生态环境和人类健康造成严重的威胁。此外,烟道气中痕量的二氧化硫(500-3000 ppm)也会导致催化剂中毒失活,不利于烟道气中C1资源的催化转化利用。因此,如何深度脱除烟道气中痕量的二氧化硫已经成
学位
金属-有机框架(Metal-organic frameworks,简称MOFs)是由金属离子或金属团簇与有机配体通过配位自组装构筑的一类晶态材料。MOFs具有丰富的拓扑结构、可调控的尺寸和孔道结构以及可功能化修饰等特点,其在化工、生物医药、能源、催化、气体吸附、能源储存等领域有着十分重要的应用。轻烃是重要的基础化工原料,其纯度直接影响下游加工过程及产品质量,针对结构及性质相近轻烃高选择性分离的难题
学位
本文主要论述了两个工作:在双向体系中无金属催化条件下,以甲酸作为氢源催化果糖绿色合成5-甲基糠醛,果糖一锅两步法制备2,5-二甲基四氢呋喃。在此,我们首先报告了一种通过碘化物介导的转移氢化绿色合成5-甲基糠醛(5-MF)的强大催化系统。使用碘化钠作为催化剂,甲酸作为氢源和助催化剂,在7.5分钟内从D-果糖中产生了大约50%的5-甲基糠醛。该催化体系连续使用6个循环,产率没有任何下降。各种淀粉和生物
学位
随着社会发展速度加快,电动汽车的发展和电子设备的需求日益增加,传统的锂离子电池因其理论容量和能量密度低已经逐渐不能够满足人类对电池的要求。锂硫(Li-S)电池因为它高的理论容量(1675 m Ah g–1)和能量密度(2600 Wh kg–1),来源广泛成本低廉且环境友好等优点,近年来受到研究人员的广泛关注,被认为是最有前景的储能器件之一。但是当前锂硫电池面临着诸多的问题,例如硫的低导电率问题、体
学位
石油、煤炭等不可再生的化石燃料的大量开采利用使得全球储量急剧减少,能源危机和化石燃料的燃烧带来的环境问题日益严峻,大力发展清洁能源迫在眉睫。储能电池是公认的清洁能源之一。自锂离子电池问世以来,锂离子电池得到快速的发展。但由于石墨负极固有容量的限制,很难实现更大的突破,不能满足“长续航”动力电车以及其他大型储能器件的发展。金属锂具有不容忽视的优势,其理论容量高达3860 m Ah g-1,能够弥补石
学位
几个世纪以来,煤炭、石油和天然气等化石燃料一直是人类活动的主要能源。化石燃料中的碳元素通过燃烧反应转化为CO2,直接排放到大气中从而加剧温室效应,导致全球气候变化和生态平衡破坏。工业生产中,CO2作为碳元素的重要来源,被应用到各种领域。故而,从化石燃料燃烧后的尾气中捕获和利用CO2不仅可以缓解温室效应,而且可以将捕获的CO2转化成具有收益的产品,实现环境效益和经济效益双赢。碳捕获技术得以应运而生,
学位