绿色巴夫藻(Pavlova viridis)的光生物反应器高效培养及其有效成分的研究

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绿色巴夫藻是一种优质的生物饵料,富含脂肪酸、甾醇等有效成分,特别是含有一类新型的被称为“巴夫甾醇”的双羟基甾醇。本文利用10L简易气升式光生物反应器对绿色巴夫藻的高效培养及其有效成分产量的调控进行了研究,以期建立绿色巴夫藻的高效培养工艺,开发利用其生物资源。 通过优化,确定了绿色巴夫藻一次性培养的适宜条件。在一次性培养中,经过两次补加营养盐,藻密度达到6.255×107cell/mL,为不补加营养盐组的1.7倍。 确立了绿色巴夫藻的半连续培养模式。在指数生长末期启动半连续培养,在1d的更新周期下,以30﹪和10﹪的更新率可分别获得最大采收量(15.252g,14d)和最大产率(0.579g/L/d)。 研究发现,绿色巴夫藻在不同生长阶段其有效成分有显著差异,另外,温度、光照、充气量、更新率及更新周期对有效物质的含量、采收均有显著的调控作用。 总脂含量在稳定期最大为235.09mg/g;而PUFA与EPA在指数生长期最大,分别为46.575mg/g和22.085mg/g。豆甾醇和谷甾醇含量在指数生长期最大,分别为3.595mg/g和3.139mg/g;4α,24-二甲基胆甾烷-3β,4β-二醇(巴夫甾醇之一)含量随着藻生长期的延长而不断上升,在稳定期达4.299mg/g,接近指数生长期时的2倍。 两种巴夫甾醇的百分含量在15℃、80μE/(m2.S) 的光照及0.1m3/h的充气量下最大,4α,24-二甲基胆甾烷-3β,4β-二醇和4α-甲基-24-乙基胆甾烷-3β,4β-二醇的分别34.37﹪和10.94﹪。 PUFA、EPA、豆甾醇及谷甾醇其含量随着更新率的上升而有增大的趋势;而4α-甲基-24-乙基胆甾-22-烯-3β-醇及巴夫甾醇含量随更新率的增加而不同程度的下降。在10﹪的更新率和1d的更新周期下,两种巴夫甾醇产率分别达到4.546mg/L/d 和1.149mg/L/d。 在巴夫甾醇的分离提取中,利用柱层析法以二氯甲烷:乙酸乙酯(1:1)的混合试剂为洗脱液可成功从总脂中分离出巴夫甾醇。
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