猪细小病毒VP₂基因是该病毒主要中和抗原。本研究克隆并表达了VP₂基因的主要抗原表位（命名为VP₂Ⅰ基因），并对其表达产物代替全病毒作为抗原的应用做了初步探索。主要包括以下几个方面的研究： 1．用PK-15增殖了猪细小病毒（PPV），根据GeneBank中已发表的猪细小病毒（PPV）VP₂基因序列，经DNAstar软件分析，选取抗原表位较集中的片段作为目的基因，利用Primer premier软件分析，设计了一对引物，用PCR的方法从病毒核酸中扩增出了大小为868bp的目的基因，命名为VP₂Ⅰ基因，将其插入真核表达载体pIREShyg中，经酶切鉴定，成功构建了真核表达载体pIRES-VP₂Ⅰ。 2．用改良的磷酸钙共沉淀法将真核表达载体pIRES-VP₂Ⅰ转染CHO细胞，通过潮霉素筛选得到阳性克隆，间接免疫荧光实验（IFA）鉴定VP₂Ⅰ在CHO细胞中的表达，并用RT-PCR的方法从转录水平证实VP₂Ⅰ在CHO-k1细胞中的表达，用PCR的方法证实VP₂Ⅰ基因已整合到了细胞基因组中，最终建立了CHO／VP₂Ⅰ细胞株。 3．利用已构建好的重组质粒pET-VP₂Ⅰ，并将其转化到宿主BL21（DE3）中，根据已确定的条件，实现了VP₂Ⅰ的高效融合表达。通过HIS-BIND树亲和层析柱对重组表达产物进行纯化，并利用用纯化产物作为抗原，初步建立了检测PPV抗体的间接ELISA方法，用该方法对临床70份血清作了检测，同时与间接血凝试验作了比较，证实该方法具有更高的灵敏性。