哈茨木霉(Trichoderma harzianum)菌株Th-30生防特性评价

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在田间用哈茨木霉(Trichoderma harzianum)Th-30生防制剂处理土壤或植株,通过对蔬菜不同生育期的农艺性状、经济性状、产量和病害发展情况的考察,研究木霉的促生作用及生物防治效果。结果表明,哈茨木霉菌株Th-30对辣椒的促生、增产作用明显,对辣椒植株的促生率为17.1%,增产15.68%,且对辣椒疫霉(Phytophthora capsici)和尖镰孢(Fusarium oxysporum)引起的根腐病具有一定的防治作用。哈茨木霉菌株Th-30能提高黄瓜的地上部生物学产量,明显增大黄瓜藤蔓的节间距,有效增加黄瓜的坐果率,对黄瓜枯萎病和黄瓜白粉病也有很好的生物防治效果。试验表明,哈茨木霉菌株Th-30对白菜、芹菜、番茄幼苗均有显著的促生作用,能增加植株的株高、地茎、叶片数,提高蔬菜的品质和产量并能有效控制芹菜病毒病的发展,且对供试植株安全。用还原糖法测定木霉菌株Th-30的几丁质酶活性,采用单因素和正交试验设计,研究了碳源、氮源、温度、pH值等发酵条件对哈茨木霉菌株Th-30生产几丁质酶的影响,并初步探讨木霉几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的拮抗作用作。结果表明,哈茨木霉菌株Th-30以7.0g/L几丁质、2.0g/L蛋白胨、营养盐溶液50mL/L、微量元素1.0mL/L为培养基,在起始pH5.5、温度28℃、装瓶量50mL/250mL、接种量8%、诱导96h获得的几丁质酶活性最高。哈茨木霉菌株Th-30几丁质酶粗提液对番茄灰霉病菌有明显的拮抗作用,对番茄灰霉病菌生长的抑制率为67.61%~71.31%,对灰霉病菌孢子产生及萌发的抑制率分别为80.95%、81.43%,对病菌孢子致病性的抑制率为65.22%~70.51%。采用紫外线诱变与药剂驯化相结合的方法,以哈茨木霉菌株Th-30为出发菌株诱导得到4株能在含常用杀菌剂福美双(Thiram)2×105μg/L的培养基上正常生长的耐药性变异菌株。毒力测定表明,福美双对几株变异菌株的EC50均相对于亲本菌株(EC50为0.21×105μg/L)提高了近2×105μg/L。筛选出一株优秀的变异菌株UV-4,在高浓度农药环境下正常生长并产生具有生防功能的几丁质酶,其耐药性几丁质酶(福美双含量为1×103μg/L)对黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum lagenarium)孢子繁殖能力的抑制率为85.43%,对黄瓜炭疽病菌孢子致病力的抑制率为68.88%,并对病原菌菌丝的细胞壁具有降解作用。试验表明人工诱导获得的突变木霉菌株UV-4的抗药性及对病原菌拮抗活性都得到改良,且具有遗传稳定性,与靶标农药混用能达到协同防治蔬菜上的真菌病害的目的。
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