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苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis）由于其特异的杀虫方式，高效的杀虫效果，而成为了一种重要的杀虫微生物，其杀虫基因通常是由大质粒所携带的，因此，对质粒的测序及其研究对于研究质粒与杀虫蛋白间的关系，认识质粒在细菌生长发育中的作用具有重要意义。本研究利用454及Solexa高通量测序技术，完成了HD73菌株中的两个大质粒（携带cry1Ac基因的pHT73质粒及pAW64质粒）的序列拼接与验证，结果表明，pHT73质粒大小为77437bp，具有77个ORF，RT-PCR的分析表明，在检测的63个ORF中61个ORF在T-1、T0、T7三个时期均有转录活性（T0为对数期终止）；pAW64质粒大小为76490bp，具有93个ORF，RT-PCR分析表明，其中91个ORF在T-1、T0、T7三个时期均有转录活性。同时，本研究还完成了HD73菌株中4个小质粒的拼接，结果表明，p1质粒大小为11769bp，具有26个ORF；p2质粒大小为8513bp，具有16个ORF；p3质粒大小为7635bp，具有10个ORF；p4质粒大小为8241bp，具有10个ORF，并完成了所有质粒编码基因的注释。为了研究质粒对菌株生长发育等性状的影响，本研究利用高温培养诱导质粒缺失，结合PCR鉴定的方法，以HD73菌株作为出发菌株，构建了4株不同质粒缺失突变体，并从实验室保存菌株中鉴定出了2株质粒缺失突变体，通过对野生型及六株突变体的多种性状比较分析表明，六种质粒的缺失类型在菌体的生长速度、芽胞萌发、芽胞产量上没有明显区别，但是，质粒的缺失会对菌体颜色及菌体的沉降速度产生影响，研究发现，p4、pHT73质粒的同时缺失会导致菌体变黄，而p3、pAW63、pHT73质粒的同时缺失具有促进菌体沉降的作用。为了获得仅有cry1Ac基因缺失的无晶体突变株及研究pHT73质粒对cry1Ac基因表达的影响，本研究利用同源重组的方式，构建了cry1Ac基因缺失的HD△cry1Ac突变体，通过对HD73、pHT73质粒缺失的HD73-T4及HD△cry1Ac菌株多种性状比较，发现cry1Ac基因的缺失对菌体生长状况、生长速度、芽胞萌发、芽胞产量没有明显影响。将融合表达载体pHT315-cry1Ac-gfp转入到HD73-T4、HD△cry1Ac菌株中，通过激光共聚焦显微镜的观察表明，HD73-T4与HD△cry1Ac菌株中cry1Ac基因表达没有明显差异。本研究完成了HD73菌株中pHT73、pAW64、p1、p2、p3、p4质粒的序列拼接，为深入研究它们的功能与作用提供了基础。