论文部分内容阅读
目的对40例NSCLC患者的肺癌组织及相对应的癌旁正常肺组织中的miR-211表达水平进行检测,旨在分析NSCLC中miR-211表达以及miR-211表达和NSCLC临床病理特征之间的关系,并进一步采用细胞实验来验证miR-211在肺癌细胞中的功能,为NSCLC的临床诊断以及治疗提供理论参考。方法根据本研究的纳入排除标准,共有2016年6月至2017年7月在安徽医科大学附属巢湖医院住院进行肺癌手术切除治疗的NSCLC患者40例作为纳入标本研究对象纳入本研究,收集临床资料信息,包括NSCLC患者的性别、年龄,肺癌切除手术记录所记载的肿瘤直径大小,病理组织学或者病理细胞学检查有无淋巴结转移,以及肿瘤分期、有无远处转移等信息。采集肿瘤组织以及对应的癌旁正常肺组织,采用qRT-PCR法对NSCLC患者的肺癌组织和细胞系(肺癌细胞A549、人支气管上皮细胞16HBE)中miR-211表达检测,对肺癌细胞A549细胞转染,并采用细胞增殖检测试剂盒8(CCK8)对发生miR211-抑制剂以及miR211无关序列对照转染的肺癌细胞A549细胞进行增殖情况检测,采用TransWell小室对发生miR211-抑制剂以及miR211无关序列对照转染的肺癌细胞A549细胞进行细胞迁移和侵袭能力检测。数据分析采用SPSS17.0统计软件,对于计量资料,如果其经正态检验发现为正态分布,则结果按照均数±标准差(mean±SD)的形式表示,两组计量资料进行比较时采用t检验,重复测量资料采用重复测量资料的方差分析;如果计量资料经正态检验发现不满足正态分布,则结果以(中位数,下四分位数上四分位数)(M,P25P75)的形式表示,两组计量资料进行比较时采用秩和检验;分类变量以例数(百分比)(N;%)表示,计数资料比较时,如果总样本量大于40,最小理论频数大于5,则采用卡方检验(χ2检验)进行比较,如果总样本量大于40,最小理论频数介于1和5之间,则采用卡方检验的矫正公式进行比较,如果总样本量小于40,或者最小理论频数小于1,则采用Fisher确切概率法进行比较,统计学检验水准取双侧?=0.05。结果1.miR-211在NSCLC患者的肺癌组织中的表达水平(2.65±0.08)显著高于其在配对癌旁正常肺组织中的表达水平(0.80±0.06)且具有统计学差异(P<0.001);miR-211在肺癌细胞A549中的表达水平(2.94±0.06)显著高于其在人支气管上皮细胞16HBE中的表达水平(0.55±0.04)且亦具有统计学差异(P<0.001)。2.miR-211表达水平和NSCLC患者的年龄、肿瘤分期、有无淋巴结转移有关,和NSCLC患者的性别、肿瘤直径大小、是否远处转移无关,NSCLC患者中miR-211高表达多见于60岁以上、晚期肿瘤(ⅢⅣ期)以及有淋巴结转移的患者。3.肺癌细胞A549细胞转染miR-211抑制剂后,其miR-211的表达水平为(0.57±0.02),明显低于miR211-对照组miR-211的表达水平(2.30±0.05)且具有统计学差异(P<0.001);miR-211抑制剂组的吸光度(A)低于miR211-对照组的吸光度(A)且具有统计学差异(P<0.05),不同时间点的吸光度(A)亦具有统计学差异(F时间=32.56,P<0.05),两组的吸光度(A)均随着时间的增加而增加;肺癌细胞A549细胞转染miR-211抑制剂72h以后,其A549细胞增殖速度(1.54±0.07)明显低于miR211-对照组A549细胞增殖速度(2.35±0.07)且具有统计学差异(P<0.001)。4.肺癌细胞A549细胞转染miR-211抑制剂后,其A549细胞侵袭细胞数(40.47±1.30细胞数/每个视野)明显低于miR211-对照组A549细胞侵袭细胞数(113.52±3.75细胞数/每个视野)且具有统计学差异(P<0.001);miR-211抑制剂组A549细胞迁移细胞数(49.11±1.44细胞数/每个视野)明显低于miR211-对照组A549细胞迁移细胞数(127.56±3.40细胞数/每个视野)且亦具有统计学差异(P<0.001)。结论miR-211在NSCLC肺癌组织中高表达,miR-211表达水平和NSCLC患者的年龄、肿瘤分期、有无淋巴结转移有关,即NSCLC患者中miR-211高表达多见于60岁以上、晚期肿瘤(ⅢⅣ期)以及有淋巴结转移的患者,60岁以上、晚期肿瘤(ⅢⅣ期)以及有淋巴结转移的NSCLC患者其miR-211表达水平会出现明显升高。miR-211具有促进NSCLC细胞增殖、侵袭以及转移的作用。在后续研究中将进一步深入探讨miR-211促进NSCLC细胞增殖以及转移的具体作用机制。本研究结果可为NSCLC的临床诊断以及预后评估提供新的生物学标志物,并为药物治疗提供新的潜在治疗靶点,具有举足轻重的临床意义。