高致病性猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病,又被称作高致病性蓝耳病。患病猪主要临床常表现为体温骤然上升、发病率高和致死率高等特点。自2006年该疫情在我国暴发以来,给养猪业带来了极重的经济冲击。该病现阶段还没有特效药物,只能靠疫苗接种进行预防。我国预防大多使用弱毒疫苗,该疫苗具备免疫功效好,免疫周期长等优势。目前,我国兽用疫苗的生产大都是采用转瓶工艺,各个批次间差别显著,质量不稳固。为提高高致病性蓝耳病疫苗的生产效率和疫苗质量,本研究拟开展Marc-145细胞培养条件和生物反应器微载体悬浮培养参数的优化。采取单因素法,优化Marc-145细胞培养液pH值、血清浓度和方瓶传代比例。结果表明,细胞培养液pH值为7、细胞培养液血清浓度为8%、细胞传代比例为1:3时Marc-145细胞培养效果最佳。为了在Marc-145细胞上得到更高滴度的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM株,对生物反应器微载体悬浮培养Marc-145细胞所用的培养液血清来源、培养基种类、微载体的用量、细胞接种量以及病毒培养时间等条件进行了筛选。结果表明,金源康公司生产的血清、DMEM培养基、细胞接种密度为20~30细胞/球、微载体为5 g等条件下细胞生长状况最好;病毒培养时间为27~36 h,病毒增殖达到最高的病毒滴度。本研究结果为微载体大规模生产PRRSV-TJM株疫苗提供了有益的资料。