种桑养蚕、缫丝织绸是我国劳动人民的伟大发明,对我国古代传统文明的传播和现代国民经济的发展作出了卓越贡献。而茧丝绸行业的基础是原料茧的生产,其数量多寡,产品优劣,科技含量等左右着丝绸业的兴衰,因此抓丝绸贸易就必须从源头抓起。实践证明培育和推广优良品种是一项投资少、见效快、经济效益高的蚕业增产增收技术手段。 另外由于长期的自然选择和人工选育,家蚕Bombyx mori已形成了4大地理系统和多种生态类型,有上千个品种。如此丰富的家蚕品种,首先需要确定品种范围,判断品种的归属性,以便更有效地保护,避免重复和遗漏;其次,随着品种种质监测要求的提高和知识产权保护意识的加强,国际上已出现了在审定品种时要附加DNA指纹图谱的趋势。利用微卫星分子标记(SSR),开展家蚕种质资源的指纹图谱、亲缘关系和分子系统发育等研究,对蚕种质的鉴定、保护、利用、核心种质的构建和遗传育种具有重要的实用价值和理论意义。本论文主要研究内容如下。 1.春秋兼用蚕品种润花×镇月的选育 根据江苏浙江等地区主要蚕区春蚕秋养或秋蚕春养的要求,把育种目标确定为培育综合性状较优的强健性稳产型蚕品种。采用杂交育种与系谱选育相结合的方法,选择优良亲本材料。经过3年十几代的连续选择和改进,育成一对春秋兼用蚕品种润花×镇月。该品种经本实验室和两年三地全国攻关点联合鉴定,结果表明:结茧率95%以上,万蚕收茧量、万蚕茧层量、万头产丝量分别比对照种提高5～15%、10～20%、15～20%,茧层率15～20%,茧丝长1000～1300米。解舒率75～88%,生丝率18～20%,净度94～96分,各项经济技术指标均达到国家考核技术经济指标。该品种体质强健,好养,耐氟,抗高温,孵化、眠起、老熟齐一,丝质优,产茧量高,产卵数多,繁育系数高,适合于长江流域、黄河流域全年饲育。该品种于2004年11月获得北方蚕业科研协作区蚕品种审定委员会第五次会议审定通过,准予在适宜地区推广使用。 2.利用微卫星标记(SSR)构建家蚕品种资源的指纹图谱 选用微卫星分子标记(SSR)对中国农科院蚕业研究所蚕种质资源保存中心的96个家蚕材料(95个品种即2个中系、85个日系二化和9个多化)进行DNA指纹图谱的构建,建立一套准确、快速、有效的鉴别家蚕品种的方法。同时把各品种的指纹图谱作为该品种的“分子身份证”,与其它经济性状,形态性状一起构成各品种的固有性状。 3.利用微卫星标记(SSR)对家蚕种质资源进行聚类和亲缘关系分析。 选用68对SSR引物对96个不同家蚕品种的基因组DNA进行扫描,用Popgene32分析扫描结果,得到各品种之间的遗传距离。对遗传距离进行聚类分析。构建分子系统树,从中可以看出除个别品种外,所研究的96个材料中多数品种均按所属系统聚为相对集中的一群,即中系、日系和热带多化3个类群。在各类群里,品种之间又按彼此间亲缘关系的远近相聚,如日系品种的苏字号、镇字号、7字号和8字号品种相对集中在一起。从总的聚类结果看,基本上含有共同亲本或互为亲子关系的,具有相同血缘的蚕品种聚为一类。分子系统树的构建为遗传育种提供有力的工具。