牛蒡皮绿原酸提取纯化及其对高脂血症大鼠作用的研究

来源 :东南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guoln
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:(1)分析牛蒡皮的主要成分;(2)研究提取牛蒡皮绿原酸的最佳工艺条件,得到牛蒡皮绿原酸提取物;(3)优化牛蒡皮绿原酸提取物分离纯化的方法条件,制备出纯度较高的牛蒡皮绿原酸;(4)了解牛蒡皮绿原酸提取物能否改善试验大鼠的脂代谢紊乱状态;了解牛蒡皮绿原酸提取物能否改善试验大鼠的氧化应激状态;(5)通过对高脂血症大鼠代谢组学的研究,探索能够表征高脂血症发生、发展和恢复状态的生物标记物。   方法:(1)采用传统植物化学物定性鉴定方法确定牛蒡皮中可能含有以及不含的植物化学物。(2)选用酸水提取法提取牛蒡皮绿原酸,在单因素试验的基础上,设计L9(34)正交优化试验,以提取率最高的条件来提取制备牛蒡皮绿原酸。(3)通过预试验以及吸附特性,选取D101大孔吸附树脂对牛蒡皮绿原酸提取物进行分离纯化,探索较好的分离纯化条件,得到纯度较高的牛蒡皮绿原酸。(4)试验大鼠分为阴性对照组、高脂模型组、牛蒡皮绿原酸提取物低剂量组和牛蒡皮绿原酸提取物高剂量组4个组,除阴性对照组外其余各组均饲以高脂饲料,受试物各组分别给予受试物牛蒡皮绿原酸提取物60、120mg/bw.kg.d灌胃。连续喂养4周,测定各组大鼠体重、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。(5)以超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)为核心技术,以主成分分析法(principal component analysis,PCA)为数据分析手段,研究阴性对照组、高脂模型组和牛蒡皮绿原酸提取物高剂量组大鼠血浆中代谢物组的变化和对应关系,找出其中可能的生物标记物。   结果:(1)通过定性实验证实,牛蒡皮中可能含有生物碱、黄酮类化合物、三萜类化合物以及酚类物质,不含糖、甙以及醌类物质。(2)单因素试验结果表明:最佳提取工艺参数为盐酸浓度1%,料液比1:80,提取时间70min,提取温度80℃,碎度24-40目,提取3次。正交试验结果表明,影响绿原酸酸水提取的主要因素为破碎度(B),其次为液料比(C)、提取次数(D)以及溶剂浓度(A)。最佳提取工艺条件为B3C3D3A2,即破碎度20-40目,料液比1:80,以0.5%盐酸水溶液提取3次,每次70min,绿原酸的得率约为0.521%。此条件即为提取牛蒡皮绿原酸的最佳条件。(3)D101大孔吸附树脂可以有效地分离、纯化出粗提物中的绿原酸。在20cm×2.5cm的层析柱上样200ml,以蒸馏水冲洗,并以40%乙醇进行洗脱,收集洗脱液,在此条件下可获得纯度为11.65%的绿原酸。(4)动物实验结果表明,与高脂模型组相比,牛蒡皮绿原酸提取物能降低高脂大鼠TG、TC水平,升高血浆HDL-c这一保护性因子水平,并且能够提高SOD、GSH-Px活性,降低MDA水平,效果以牛蒡皮绿原酸高剂量组最为明显,而且从结果来看,其降脂以及抗氧化的效果均较好。(5)对血浆中小分子成分的鉴别比较表明,牛蒡皮绿原酸提取物高剂量组、阴性对照组以及高脂模型组间存在差异。   结论:(1)酸水提取法,虽然不是新型的提取方法,但与常规水提法相比,具有高效的优点;与醇提法相比,提取效果相差不大,但可以避免大量有机溶剂的使用,可以减少有机污染,有广阔的发展前景。试验证实其适合提取牛蒡皮中的绿原酸,最佳提取工艺条件为:破碎度20-40目,料液比1:80,以0.5%盐酸水溶液提取3次,每次70min,绿原酸的得率约为0.521%。(2)D101大孔吸附树脂可以有效地分离纯化粗提物中的绿原酸,最佳条件为:在20cm×2.5cm的层析柱上样200ml,以蒸馏水冲洗,并以40%乙醇进行洗脱,收集洗脱液,在此条件下可获得纯度为11.65%的绿原酸。D101大孔吸附树脂可以较好地分离纯化牛蒡皮粗提物中的绿原酸,该树脂的吸附特性适合分离牛蒡皮中的绿原酸,可得到较高纯度的牛蒡皮绿原酸,为进一步的功能试验奠定了基础。(3)牛蒡皮绿原酸提取物对大鼠高脂状态具有良好的调节作用,同时对高脂大鼠的氧化应激状态具有良好的调节作用,具体机制有待进一步的研究。(4)发现牛蒡皮绿原酸提取物高剂量组、阴性对照组以及高脂模型组血浆中的小分子成分存在差异,但是具体物质的鉴定工作尚需进一步的试验。
其他文献
党的十八大以来,习近平总书记提出了“全面从严治党一切工作要落实到党支部”等一系列新的要求及重要思想,这对石油企业全面推进党的建设新的伟大工程指明了方向.长庆油田公
面对西方思想文化的侵袭,新时代高职院校学生党建工作面临新挑战.山东理工职业学院学生党支部通过以“传统文化促党建,德技并举育商才”为品牌的特色活动,切实落实高校“立德
习近平总书记在十九届中央纪委四次全会上强调,一体推进不敢腐、不能腐、不想腐,不仅是反腐败斗争的基本方针,也是新时代全面从严治党的重要方略.中国共产党第十八届六中全会
国企党建的重心在基层,创新的活力也在基层,国企基层党组织在突出政治功能抓强党建的同时,更要把党建融入企业科研生产经营管理的各领域各环节,发挥党建的组织力、生产力、战
本文选择中美两国高中物理教学用书,以其中关于光的双缝干涉实验为例,从知识铺垫与实验模块两个维度进行对比分析.我国教材虽存在知识铺垫完整等独到性优势,但其实验模块不够
本文从国有企业基层党组织建设要求、政治核心作用的内涵、发挥政治核心作用中应把握的几个方面对国有企业基层党组织发挥政治核心作用进行了简要论述.
目的: (1)调查江苏省苏南某县级市3~7岁幼儿园儿童智力水平及其影响因素,监测其体内血铅含量和了解其分布特点,探讨儿童血铅与其认知能力之间的关系,同时探讨社会环境因素对智力
新时代,为了更好地适应发展需要,企业需要对党建工作更加关注和重视,在发展过程中建立完善的党建体系,以充分适应新时代的发展需要,促进企业人员思想水平的提高.基于此,本文
国有城建开发企业作为国家发展过程中的重要组成部分,其发展状况和国家未来城市建设情况,因此必须要对其内部基层党建工作提高重视.因此,本文针对国有城建开发企业的党建工作
新桥煤矿党委通过创新实施“星级工程”创建,把党建工作同中心工作紧密结合,一手抓党建、一手抓促效,将“五项服务”与生产经营紧密结合,解决了党建工作与中心工作“两张皮”