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目的肺表面活性物质相关蛋白A是原发性肺腺癌非常有价值的免疫组织化学标志,本研究旨在检测不同病因引起的胸腔积液患者其胸水中肺表面活性物质相关蛋白—A、D(SP-A、SP-D),同时检测胸水中磷脂,探讨联合监测SP-A、SP-D和磷脂对胸腔积液,尤其是结核性胸腔积液和原发性肺腺癌性胸腔积液的鉴别诊断价值。胸腔镜下对胸膜粘连肥厚进行评估,探讨不同原因胸腔积液患者胸水中肺表面活性物质含量是否与胸膜粘连肥厚有关。方法1.采用微量BCA法测定胸水中总蛋白,Western-blotting检测胸水中肺表面活性物质相关蛋白-A和D。其中SP-A和SP-D光密度值采用AlphaImager 2000软件分析以曲线下面积表示。2.硫酸-高氯酸消化-孔雀绿显色法检测胸水中总磷脂含量。3.胸腔镜下胸膜粘连肥厚评估参照Lee YC的方法:1分:壁层和脏层胸膜没有粘连;2分:壁层和脏层胸膜间罕见粘连;3分:壁层和脏层胸膜可见散在粘连;4分:壁层和脏层胸膜间有很多粘连,但两层胸膜无融合;5分:壁层和脏层胸膜间有很多粘连,但两层胸膜融合少于单侧胸腔的5%;6分:壁层和脏层胸膜间有很多粘连,两层胸膜间融合占单侧胸腔5%～25%;7分:壁层和脏层胸膜间有很多粘连,且两层胸膜间融合占单侧胸腔25%～50%;8分:壁层和脏层胸膜间有很多粘连,两层胸膜间融合大于单侧胸腔50%。结果1.各组胸水中总蛋白含量①原发性肺腺癌患者胸水中总蛋白为32.2±12.31ug/uL,结核性胸膜炎患者胸水中蛋白含量为29.4±8.97ug/uL,两者总蛋白差异无统计学意义(P＞0.05)。②其它:6例原发性肺鳞癌总蛋白含量为33.5±10.27ug/uL;2例小细胞肺癌分别是29.6ug/uL和34.8ug/uL;2例胸膜间皮瘤总蛋白分别为35.3ug/uL和32.8ug/uL;4例乳腺癌胸膜转移及肺炎旁胸腔积液的蛋白平均为30.5±3.37ug/uL和29.5±4.36ug/uL,由于样本数量太少,未做统计学分析。2.胸水中SP-A、SP-D含量①原发性肺腺癌患者胸水中SP-A光密度值高于结核性胸膜炎患者(265.1±141.1 vs 180.0±64.1,P＜0.05),差异有统计学意义。②原发性肺腺癌患者胸水中SP-D光密度值高于结核性胸膜炎患者(299.9±140.6 vs 206.8±86.8,P＜0.05),差异有统计学意义。③36例原发性肺腺癌患者中有23例胸水中SP-A＞250,有16例SP-D＞250,而SP-A＞250和(或)SP-D＞250有29例。28例结核性胸膜炎患者胸水中SP-A、SP-D均未超过250。④其它:本实验还测定了4例乳腺癌胸膜转移患者,蛋白条带较结核性胸膜炎患者要浓,6例鳞癌中有2例显出条带4例无显影,2例胸膜间皮瘤及2例小细胞肺癌均未显影,4例肺炎患者蛋白条带浓淡不一,由于样本数量太少,未做统计学分析。3.胸水中总磷脂含量①原发性肺腺癌患者胸水中磷脂磷含量高于结核性胸膜炎患者(0.9156±0.4380mmol/L vs 0.9148±0.2870 mmol/L,P＞0.05),差异无统计学意义。②其它:6例原发性肺鳞癌总磷脂磷含量为0.8257±0.2005 mmol/L;2例小细胞肺癌分别是0.8756 mmol/L和0.7120 mmol/L;2例胸膜间皮瘤总磷脂分别为0.7153 mmol/L和0.7589mmol/L;4例乳腺癌胸膜转移及肺炎旁胸腔积液的磷脂平均为0.7257±0.1235 mmol/L和0.8356±0.1587 mmol/L,由于样本数量太少,未做统计学分析。4.肺表面活性物质与胸膜肥厚关系①胸腔镜下观察到结核性胸膜炎患者,胸膜粘连更多见。结核性胸膜炎患者胸膜粘连评分高于原发性肺腺癌性胸腔积液患者(4.3±1.3 vs 2.2±1.0,P＜0.05),差异有统计学意义。②结核性胸膜炎患者依据胸水中SP-A和SP-D表达分别分为三组:A1组:250＞SP-A＞200,A2组:200＞SP-A＞100,A3组:SP-A＜100;D1组:250＞SP-D＞200,D2组:200＞SP-D＞100,D3组:SP-D＜100。结核性胸膜炎患者组间比较结果:A1组与A2组比较(3.3±0.5 vs 3.8±0.8,P＞0.05),差异无统计学意义。A1组与A3组比较(3.3±0.5 vs 5.3±0.3,P＜0.05),差异有统计学意义。A2组与A3组比较(3.8±0.8 vs 5.3±0.3,P＜0.05),差异有统计学意义。D1组与D2组比较(3.0±0.4 vs 3.6±1.1,P＞0.05),差异无统计学意义。D1组与D3组比较(3.0±0.4 vs 5.0±0.7,P＜0.05),差异有统计学意义。D2组与D3组比较(3.6±1.1 vs 5.0±0.7,P＜0.05),差异有统计学意义。③原发性肺腺癌性胸腔积液及其它恶性胸腔积液患者,在胸腔镜下很少观察到胸膜粘连。结论1.肺表面活性物质相关蛋白A是原发性肺腺癌的免疫组织化学标志,对原发性肺腺癌的鉴别诊断有价值,联合监测肺表面活性物质相关蛋白D对原发性肺腺癌和结核性胸腔积液的鉴别诊断更有意义。2.原发性肺腺癌性胸腔积液与结核性胸膜炎患者胸水中肺表面活性物质—磷脂比较,两者差异无统计学意义。3.目前关于胸膜粘连的机制尚不清楚,有报道胸膜腔内转化生长因子β(TGF-β),血管内皮生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),肿瘤坏死因子α(TNF-α),纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)及纤维蛋白原可能与胸膜粘连纤维化有关。胸膜粘连肥厚是个复杂的过程,并不是某个因子可以决定的,SP-A、SP-D可能影响结核性胸膜炎胸膜肥厚粘连的过程。