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珍珠主要由碳酸钙等无机盐组成,此外还有一些有机组分,主要为不溶于水的有壳角蛋白,其次还有一些少量的珍珠蛋白,维生素,氨基酸等。珍珠蛋白可能是珍珠的活性成分之一。本文主要研究机械力辅助提取技术提取淡水珍珠中的蛋白成分,并对提取的珍珠蛋白进行分离纯化研究,最后对珍珠蛋白的美白活性和抗氧化活性进行研究。研究结果如下: 1、研究对比了机械化学辅助提取珍珠蛋白与直接釜式提取珍珠蛋白之间效果的差别,确定了以Na2CO3为助磨剂的机械力辅助提取方法作为最佳的方法。通过五个主要因素进行单因素考察,并选取了影响最大的三个因素进行响应面优化,确定该方法的较佳工艺条件:溶剂水:珍珠粉:助磨剂Na2CO3=200:10:1.23,AGO-2高能行星式球磨机研磨6min,39℃水浴搅拌提取时间1 h。该工艺下比提取率达到93.16%,比提取方法中次优的以pH=3,NaOAc/HOAc缓冲溶液提取法高出34.56%。 2、通过XRD分析看出珍珠粉与碳酸钠共磨导致了珍珠粉中的霰石和方解石晶粒的减小和结晶度的降低,可能影响了珍珠中有机质和碳酸钙的结合的强度,从而使得珍珠蛋白等少量的有机成分更易在水中溶出。 3、提取液经过透析,再采用阴离子交换层析,采用0.5 M NaCl和纯水体系从低浓度至高浓度梯度洗脱,再经过透析,干燥得到了4.98 mg的淡黄色珍珠蛋白粉末。采用超滤、Sephadex G-50层析和循环制备液相分离,等到两个单一组分的珍珠蛋白,用SDS-PAGE电泳测定分子量一个在35 kDa左右,另外一个则大于100 kDa。 4、通过酪氨酸酶活性抑制实验看出珍珠蛋白具有良好的美白作用,分子量35kDa的珍珠蛋白半数清除率浓度达到72.15 ug/mL,美白效果略优于熊果苷。通过体外抗氧化实验可以看出珍珠蛋白具有一定的抗氧化活性,然而经过木瓜蛋白酶初步水解的产物抗氧化活性显著加强,说明水解可能产生活性肽类物质。