白蛋白结合Schiff碱金属配合物的制备及抗氧化活性

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寻找高效、低毒、廉价的抗氧化剂是生物,化学,医学等领域的重要研究课题之一。希夫碱及其衍生物与过渡金属离子所形成的配合物具有抗氧化等生物活性,已经引起了人们的重视,但是其一些缺点限制了进一步的应用。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白,能与许多内源性和外源性物质、也能同难溶于水的物质广泛结合。本文在对氧自由基、抗氧化剂主要类别及主要代表物质进行综述的基础上,采用混合溶剂法制备了牛血清白蛋白(BSA)结合Schiff碱金属配合物,并对其抗羟基自由基活性进行了研究,以找到最佳的抗氧化剂。为寻找、设计新型的抗氧化剂,丰富抗氧化剂种类提供依据。第一,首次采用混合溶剂法制备了牛血清白蛋白结合Salphen型Schiff碱金属配合物(BSA-HOSalphenM,M=Co, Mn),并采用圆二色谱(CD)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行了表征,发现HOSalphenCo:BSA的结合比例低于10时Schiff碱金属配合物的加入对BSA的结构影响较小。采用邻二氮菲-Fe2+氧化法对BSA-HOSalphenCo的抗氧化活性进行了研究,发现BSA-HOSalphenCo系列化合物具有优异的清除自由基的活性。其中,当结合越多HOSalphenCo时,BSA-HOSalphenCo系列化合物的清除羟基自由基的活性越高。结合对BSA结构影响的考虑,认为BSA-HOSalphenCo-10是这个体系中最佳的抗氧化剂,其EC50数值是15.2μmol/L,远大于传统抗氧化剂VC的EC50值,即BSA-HOSalphenCo-10具有优异的抗氧化活性。并对可能的抗氧化机理进行了探讨。第二,制备了白蛋白结合Salen型Schiff碱金属配合物(BSA-HOSalenM,M=Co,Mn,Zn),并研究了其抗羟基自由基活性,发现:HOSalenCo:BSA的结合比例低于10时Schiff碱金属配合物的加入对BSA的结构影响较小;BSA-HOSalenCo化合物具有优异的清除自由基的活性。其中,结合HOSalenCo越多的化合物其清除羟基自由基的活性越高,其中BSA-HOSalenCo-10的EC50数值是54.0μmol/L。第三,制备了白蛋白结合N-4-羟基水杨醛缩苯丙氨酸Schiff碱金属配合物(BSA-HOSalpheM,M=Co,Mn,Zn,Fe,Cu),并研究了其抗羟基自由基活性,发现:HOSalpheM:BSA的结合比例低于10时Schiff碱金属配合物的加入对BSA的结构影响较小;不同金属其抗氧化活性不同,其中金属Fe表现出了突出的抗氧化活性。BSA-HOSalpheFe-10是系列化合物中最佳的抗氧化剂,其EC50数值是53.9μmol/L本论文的创新之处:首先采用混合溶剂法分别将三个系列的难溶性小分子Schiff碱金属配合物(DMSO体系)结合到水溶性的白蛋白(PBS体系)上,得到新型水溶性白蛋白结合Schiff金属配合物;其次,通过将Schiff碱金属配合物与BSA的结合,提高了蛋白质与Schiff碱金属配合物的抗氧化活性。
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