阳明病(阳明腑实证)模型大鼠“欲解时”肠黏膜TLR2及TLR9变化的研究

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目的:通过观察连续5天内阳明腑实证模型大鼠在阳明病“欲解时”中心时及其对时TLR2、TLR4、TLR9、MyD88蛋白灰度值及m RNA相对表达量的变化,比较TLRs受体的表达差异及昼夜节律变化及大承气汤干预效果的研究,初步探讨阳明病“欲解时”时间治疗学意义。方法:实验第1-12天模型组及药物组运用热性药煎液灌胃,第13-14天大鼠自身粪便混悬液灌胃,第15天腹腔注射内毒素,第16天起药物组在不同时点予以大承气汤煎液灌胃,同时于阳明病欲解时中心时及其对时分别处死实验大鼠留取大鼠小肠组织,采用免疫组化法测定肠粘膜中TLR2、TLR9、MyD88蛋白灰度值水平,荧光实时定量PCR测定肠粘膜TLR2 m RNA、TLR9 m RNA水平。结果:TLR2、TLR9、MyD88蛋白灰度值:实验各组间比较无统计学差异(P>0.05),实验各组每天非欲解时与欲解时之间比较无统计学差异(P>0.05);TLR4蛋白灰度值:模型组、药物组第3天非欲解时TLR4蛋白灰度值与正常组相比有统计学差异(P<0.05),其余各天各组间无统计学差异(P>0.05);正常组第3天TLR4蛋白灰度值非欲解时与欲解时比较有统计学差异(P<0.05),其余实验各天非欲解时与欲解时相比无统计学差异(P>0.05);TLR2 m RNA相对表达量:正常组、模型组在第1天,欲解时组小于非欲解时组,且均具有统计学差异(P<0.05);TLR9 m RNA相对表达量:正常组在第1、5天非欲解时组小于欲解时组,且具有统计学差异(P<0.05),药物组在第4天非欲解时组小于欲解时组,且具有统计学差异(P<0.05);结论:阳明腑实证模型大鼠TLR4、MyD88蛋白表达较正常组有所提高,而TLR2、TLR9蛋白表达较正常组不明显,甚至低于对照组。大承气汤干预后可下调TLRs的高表达,上调TLRs的低表达,表明非欲解时TLRs对LPS识别更为敏感,欲解时TLRs对LPS的识别弱于非欲解时,故而在欲解时期间相关炎症因子的释放减少。
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