多倍体水稻胚乳发育中几个淀粉合成相关酶及其基因的初步研究

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水稻是世界人口的主食来源之一。随着世界人口的不断增加以及人们对生活品质的要求越来越高,目前的水稻产量及品质不能满足现状。因此,水稻育种研究者的任务艰巨,尽早研究出高产、优质水稻。本实验室利用远缘杂交和多倍体化双重优势,经过多年实验选育出2个具有减数分裂稳定性(Polyploid Meiosis Stability, PMeS)的多倍体水稻品系(HN2026-4X和SG99012-4X)中的HN2026-4X,它减数分裂基本正常,具有较高结实率,与其它多倍体水稻的杂交后代也具有高结实率,尤其是它的后代直链淀粉含量降低、支链淀粉含量升高。稻米蒸煮食用品质的优劣由直链淀粉和支链淀粉在胚乳中的组成决定,合适的直链淀粉含量是优质稻米的重要指标。因此,对该多倍体水稻胚乳中淀粉合成中关键酶的酶活及相关基因的表达分析意义重大。本研究首先采用双波长法分别对日本晴-2X、HN2026-2X、HN2026-4X、巴利拉-2X和巴利拉-4X这5个水稻品系进行稻米直链淀粉和支链淀粉含量测定。其中直链淀粉含量测定的主波长用620nm,参比波长用430nm,支链淀粉含量测定的主波长用540nm,参比波长用720nnm。然后,针对这5个水稻品系花后6天、9天、12天、15天、18天、21天的6个时期水稻胚乳,选取水稻淀粉代谢中的ADPG焦磷酸化酶(ADPglucose pyrophosphorylase)、颗粒淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase)和可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase)这3个关键酶,分别进行这3个酶的酶活变化分析。最后,结合日本晴品种中的淀粉合成相关酶基因的克隆和功能分析结果,针对这5个水稻品系花后0天、3天、6天、9天、12天、15天、18天、21天的8个时期水稻胚乳,选取6个淀粉合成相关酶基因OsAGPS2b、OsSSⅠ、OsSSⅡa、OsGBSSⅠ、OsBEⅠ、OsBEⅡb,进行RT-PCR。结果发现:HN2026-4X的直链淀粉含量低、支链淀粉高。在水稻灌浆早期,HN2026-4X的AGPase活性较高;中后期,其活性较低。在水稻灌浆中后期,HN2026-4X的GBSS活性低于其他四个品系。HN2026-4X的SSS活性大多低于巴利拉-2X,高于其他三个品系。HN2026-4X的OsAGPS2b基因、OsSSⅠ基因和OsBEⅡb基因处于中上表达水平;其OsGBSSI基因、OsSSⅡa基因处于中下表达水平。HN2026-4X的OsGBSSI基因发生变化,有一大一小两个编码框组成,其中1584bp编码的多肽比正常的GBSS少82个氨基酸。
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