基于缝隙增强拉曼探针的高灵敏侧流层析免疫检测法

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侧流层析免疫检测试纸被广泛应用在检测领域,但由于传统的基于胶体金比色法的试纸灵敏度不高,不能满足很多临床需求。因此,在试纸体系中改用高灵敏的检测方法对于试纸的进一步发展十分重要。表面增强拉曼光谱(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术是用以提升侧流层析试纸灵敏度的一种潜在方法,然而目前SERS技术还存在信号重复性差以及拉曼特征峰不能重叠而导致报告分子的选择范围依然受限等问题。本论文首先合成了三种新型的内嵌拉曼报告分子的核壳结构表面增强拉曼探针—缝隙增强拉曼探针,具有高拉曼增强倍数、高光稳定性、高重复性等优点。同时本论文引入了两种拉曼光谱的数学处理方法—经典最小二乘法和非负矩阵分解法,实现了从混合拉曼光谱中分离出单一组分拉曼光谱的目的,解决了特征峰重叠的问题。最后,本论文结合缝隙增强拉曼探针和拉曼光谱的数学处理方法,构建了一种基于缝隙增强拉曼探针和双颗粒校准体系的侧流层析免疫检测试纸,可极大地减少试纸检测中的非特异性吸附对检出限的影响,其检出限比传统的胶体金比色法降低了两个数量级。该检测试纸对人绒毛膜促性腺激素(HCG)、急性心梗标志物心肌肌钙蛋白I(c Tn I)和脑尿钠肽(BNP)的检出限分别达到了0.99 pg/m L,0.69 pg/m L和0.18 pg/m L,完全满足目前的临床需求,有望在急性心梗的快速检测中实现巨大应用价值。
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