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注射用双黄连(Shuanghuanglian for Injecting,SHLI)临床不良反应报道日益增多,尤其是过敏反应。在临床应用中,SHLI以导致急性过敏样反应居多。急性过敏反应包括类过敏反应和Ⅰ型过敏反应,二者在临床表现方面较为相似,但发生机制不同。前者无需IgE介导,首次接触即可产生症状,与给药速度呈正相关。本研究通过以下几个方面证实了类过敏反应是SHLI临床发生不良反应的主要类型之一,并对SHLI类过敏反应发生机制及其检测体系的建立进行了探索性研究,为建立中药注射剂类过敏反应评价方法提供新的思路和依据。1 SHLI急性过敏反应类型探究昆明小鼠分别尾静脉注射生理盐水、Compound 48/80、SHLI、黄芩苷、绿原酸和连翘苷后,观察小鼠类过敏反应症状,结果表明,Compound 48/80可致小鼠产生爬行、平伏和惊厥等反应;360 mg/kg、720 mg/kg和1440 mg/kg SHLI可致小鼠出现摇晃、爬行、平伏、惊厥和死亡等反应,且随剂量增加反应程度加重。黄芩苷、绿原酸和连翘苷处理小鼠无明显上述症状表现。Wistar大鼠分别尾静脉注射生理盐水、抗原OVA和SHLI致敏三次,末次致敏后第10天取血检测血清IgE水平。结果表明,OVA组血清总IgE浓度达147.9±25.5μg/mL,明显高于正常水平(p＜0.05),而SHLI组血清总IgE水平与生理盐水组比较无显著性差异。2 SHLI类过敏反应及其机制研究体外试验,生理盐水、Compound 48/80、SHLI、黄芩苷、绿原酸和连翘苷分别与大鼠腹腔肥大细胞共孵育,检测细胞的组胺释放率。结果显示,Compound48/80组组胺释放率达76.9±1.8%,明显高于生理盐水组(p＜0.01)。SHLI、黄芩苷、绿原酸和连翘苷致肥大细胞组胺释放率与生理盐水比较无显著性差异。体内试验,大鼠分别尾静脉注射生理盐水、Compound 48/80和SHLI,检测给药后血液中组胺和类胰蛋白酶水平,结果表明,Compound 48/80和SHLI可致大鼠体内组胺和类胰蛋白酶水平明显升高(p＜0.01)。3 SHLI类过敏反应检测体系建立的探索监测给予不同药物的麻醉大鼠的血压和心率。3.1 SHLI对平均血压和心率的影响单次静脉注射0.1 mg/kg、1.0 mg/kg和5.0 mg/kg组胺后,大鼠血压迅速下降,最大降压幅度分别为59.2 mmHg、46.0 mmHg和64.3 mmHg,降压持续时间随剂量增加而延长。静脉注射100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg SHLI后,大鼠同样呈现血压迅速下降现象,最大降压幅度分别为89.1 mmHg、84.8 mmHg和90.1 mmHg,2～3 min后恢复到基础水平。而大鼠心率未见规律性变化,给药均可引起心率加快、减慢或不变。重复静脉注射组胺两次,每次剂量1.0 mg/kg,大鼠两次血压降低的持续时间和最大降压幅度均相似。重复静脉注射SHLI产生类似效应。3.2苯海拉明对SHLI所致血压降低的影响大鼠依次静脉注射组胺(0.1 mg/kg)、盐酸苯海拉明和组胺(0.1 mg/kg),两次给予组胺后血压的平均降低幅度分别为69.1 mmHg和15.3 mmHg(p＜0.01)。大鼠依次静脉注射SHLI(200 mg/kg)、盐酸苯海拉明和SHLI(200 mg/kg),两次给予SHLI后血压的平均降低幅度分别为60.3 mmHg和38.1 mm Hg(p＜0.01)。3.3 Cromolyn对SHLI所致血压降低的影响注射Compound 48/80(0.1mg/kg),血压由162.8±12.4mmHg降至104.5±12.0mmHg(p＜0.003),而预先滴注Cromolyn后再注射Compound 48/80(0.1mg/kg),给药前后血压基本不变。注射SHLI(200mg/kg),血压由156.7±4.6mmHg降至81.4±6.9mmHg(p＜0.00005),预先滴注Cromolyn后再注射SHLI(200mg/kg),血压由163.4±4.6mmHg降至77.6±4.6mmHg(p＜0.0002)。3.4 SHLI滴注速度对血压的影响大鼠静脉滴注SHLI(400mg/kg)4.0mL,滴注速度分别为0.8mL/min、0.4mL/min和0.2mL/min,结果表明,滴注速度越快最大降压幅度越大,当滴注速度降低至为0.2mL/min时,血压未见降低。4降压物质检测采用药典降压物质检测方法,结果显示SHLI剂量达2.8mg/kg即可引起猫血压下降。上述结果表明,SHLI导致的急性过敏反应可能主要为类过敏反应,其主要发生机制可能为通过释放组胺和类胰蛋白酶等生物活性介质导致机体多系统产生毒性反应,SHLI本身也可能含有具有类组胺效应的成分,在血压下降等症状的产生过程中发挥作用。血压监测具有直接、灵敏和简便等特征,有可能成为SHLI类过敏反应检测体系的灵敏指标之一,建议SHLI安全性评价中增加降压物质检测项目。