论文部分内容阅读
目的研究H2型松弛素（H2Relaxin）对慢性支气管哮喘模型小鼠气道重塑及肺组织细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达的影响，探索Relaxin在哮喘治疗中的可能作用。方法将40只BALB／c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、哮喘组、阴性对照组（vehicle）、Relaxin组4组，每组10只；卵清蛋白（OVA）致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型；vehicle组和Relaxin组每日分别给予生理盐水和Relaxin（0.25mg·kg-1·d-1）皮下注射。HE和马森（Masson）染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况；采用免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测BALF中IL-4、IL-13、血清总IgE水平及肺组织羟脯氨酸含量；用逆转录-PCR（RT-PCR）及免疫印迹法（Western blot）分别测定各组小鼠肺组织中cyclin D1mRNA、cyclin D1和p-ERK表达水平。结果哮喘组、vehicle组与健康对照组相比，嗜酸粒细胞浸润增多，气道管腔狭窄，平滑肌层增厚，胶原纤维增生，而Relaxin组上述改变较此2组轻。哮喘组气道炎症指标（IL-4，IL-13）显著高于健康对照组，Relaxin干预可以减轻气道炎症情况；与健康对照组相比，哮喘组、vehicle组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加（均P<0.05），Relaxin组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组和vehicle组（均P<0.05）；哮喘组和vehicle组小鼠羟脯氨酸含量［每克肺组织中分别为（0.68±0.10）mg、（0.67±0.10）mg］，高于健康对照组的（0.26±0.05）mg（q值分别为16.61和16.01，均P<0.01），Relaxin组小鼠羟脯氨酸含量为（0.40±0.06）mg，低于哮喘组和vehicle组（q值分别为10.88和10.26，均P<0.05）；Western blot检测显示，cyclin D1在哮喘组、vehicle组和Relaxin组表达（分别为1.38±0.18，1.50±0.10，0.72±0.13）高于健康对照组的0.38±0.10(q分别为13.00、14.65和4.49，均P<0.05)，而Relaxin组表达量低于哮喘组与vehicle组(q值分别为8.51和10.16，均P<0.05)；各组小鼠ERK磷酸化水平的趋势与cyclin D1表达相似。哮喘组与vehicle组各项检测指标间差异无统计学意义（P>0.05）。结论Relaxin显著减轻慢性哮喘小鼠气道炎症反应和平滑肌层的增厚，延缓哮喘小鼠气道重塑进程，该作用可能部分与其下调cyclin D1表达有关。