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氮素是导致水体污染的一类重要污染物,可引起水体的富营养化。生物脱氮是目前污水脱氮处理中最常用的方法,但工艺复杂,一般经过好氧的硝化过程和缺氧的反硝化过程才能够将氨氮转化为氮气。近年来,一些异养硝化菌的发现为生物脱氮提供了新的思路,可以实现同步硝化反硝化。但已报道的异养硝化细菌脱氮过程中往往会产生亚硝酸盐及N2O,不利于实际应用。本课题筛选出一株直接将氨氮转化为氮气,没有或少量产生亚硝酸盐、N2O的异养硝化菌,为新型脱氮技术的发展打下基础。 通过极限稀释法及平板划线分离法,共筛选到了6株异养硝化菌,其中YY-5脱氮效果最好,24 h内可将58mg/L氨氮全部脱除。经鉴定,为不动杆菌属,命名为Acinetobacter sp.YY-5。 通过单因素实验以及正交实验确定了Acinetobacter sp.YY-5最佳脱氮条件:30℃,C/N=12,pH=10.0;并发现YY-5在脱氮过程中有N2产生,但没有硝酸盐、亚硝酸盐及N2O的产生;培养基pH值明显升高,且氨氮脱除不是由于高碱环境下氨挥发造成的。这些特点跟传统的异养硝化细菌具有很大差别。 通过对YY-5脱氮过程中各种含氮代谢物的定量以及相关基因、蛋白的初步分析,发现YY-5中的羟胺氧化酶(HAO)在好氧条件下可将羟胺氧化,氧化产物中未检测出亚硝酸盐;而已报道的其它异养硝化细菌好氧条件下HAO催化羟胺氧化产物为亚硝酸盐,两者差别较大;而且实验证明,YY-5没有好氧反硝化功能,却能够产生大量氮气。因此,认为YY-5脱氮途径跟已报道的异养硝化途径不同,据此提出了YY-5脱氮假设途径,即氨氮经氨单加氧酶(AMO)转化为羟胺,羟胺经YY-5特有的HAO的作用直接转化为氮气。 将YY-5接种于生活污水、工业废水、食品加工废水以及垃圾渗滤液中,检验其在实际污水中脱氮效果。发现YY-5对小分子碳源具有较强的依赖性;在加入小分子碳源的情况下,YY-5对各类污水都具有较强的脱氮能力,氨氮去除率为82.93%~94.35%。