CA是从一种链霉菌株的发酵产物中分离出来的大环内酯类强效免疫抑制剂。大量动物实验与临床应用研究发现,CA的免疫抑制作用比环孢菌素A(CsA)高10～100倍,而不良反应更少。临床主要应用于移植排斥,也应用于自身免疫疾病的治疗,它对于角膜移植排斥、干眼病、顽固性葡萄膜炎、巩膜炎、过敏性结膜炎等眼部疾病也显示出满意疗效。目前,CA的上市剂型有胶囊、注射剂和软膏。其滴眼剂型在国内外均无上市。该药滴眼剂型属于国家二类新药,所以开发其滴眼剂型有着重要的意义,这将会带来巨大的社会效益和经济效益。然而由于CA在水中几乎不溶,溶解度仅为2μg/ml,并且其水溶液很不稳定,本研究选择制备其混悬型滴眼液。为了得到高质量的混悬滴眼液,本研究先制备CA的固体分散体,然后以CA的固体分散体作为中间体制备其混悬型滴眼液。此法优于传统的机械粉碎或微粉化等技术,制得的滴眼液外观均匀细腻,粒径小且分布窄,对眼睛的刺激性小,与其油溶液和眼膏相比具有更好的安全性和顺应性。目的:选择合适的水溶性载体材料,制备CA固体分散体,进一步制备其混悬型滴眼液。设计混悬型滴眼液的处方和制备工艺,建立制剂质量控制的方法,考察滴眼液的稳定性、刺激性、药效。方法:CA混悬滴眼液的制备:在参考文献的基础上,制备三种不同载体不同比例的固体分散体,包括羟丙基-β-环糊精、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。采用传统溶剂法和尝试采用新方法制备CA固体分散体,新方法不需加入二氯甲烷,因为国际药品注册协调会议不提倡加入二氯甲烷。加入助悬剂、渗透压调节剂、润湿剂、絮凝剂等附加剂制备成混悬液,对其外观、pH、粒度、沉降比、再分散性、稳定性等进行考察,筛选出最佳处方。质量评价及稳定性研究:采用光学显微镜和激光散射粒度仪测定粒径,旋转式黏度计测定黏度,微电泳法测定Zeta电位,HPLC法测定含量和相关物质等。将最佳处方的眼用混悬液分别进行高温实验、强光照射实验、加速实验、长期留样,考察其稳定性。家兔眼部刺激性实验:将受试物滴入到家兔一侧眼结膜囊中,另一侧作为空白对照。给药后,在规定时间,对多次给药对眼部的刺激症状进行检查、记录,以Draize眼部刺激试验评分标准评价刺激程度。药效实验:本部分试验考察了CA混悬滴眼液治疗干眼症的效果。通过采用一日三次局部使用1%硫酸阿托品的方法建立家兔干眼模型,通过SIT(Schirmer I Test)值、角膜荧光素染色等眼表因素进行判断,在干眼症模型成型后进行药效学评价。结果:从粒度,混悬滴眼液的物理和化学稳定性和生物利用度等方面综合考虑,最终确定混悬滴眼液的最佳处方为:100ml滴眼液中含: CA 0.1g羟丙基甲基纤维素(3厘泊) 0.3g吐温-80 0.1g无水枸橼酸一钠2.25g氯化钠0.15g尼泊金乙酯0.03g羟丙基甲基纤维素(K10M) 0.4g NaOH适量注射用水适量pH 6.0～6.5HPLC测定固体分散体溶出度的标准曲线为:A=7.5848×104C– 1.1405×103 (r = 0.9998,n=7),溶出介质为蒸馏水,方法平均回收率为99.9%,日内精密度为1.32%,0.73%,0.47%,日间精密度为2.31%,1.46%,1.05%,符合中国药典规定。HPLC测定滴眼液含量的标准曲线为:A= 1.5656×107C + 1.0752×104 (r = 0.9999,n=7),方法平均回收率为100.6%,精密度为1.59%,符合中国药典规定。质量评价及稳定性研究:按照最佳处方制备三批样品,外观为白色均匀细混悬液,粒度、沉降容积比、再分散性、pH、渗透压、含量均符合中国药典规定。高温实验结果表明混悬滴眼液在温度60℃下,外观、含量、相关物质均无显著变化;强光照射实验结果发现,混悬滴眼液在强光4500±500lx下,外观无显著变化,相关物质略有增加;加速(40℃)和长期(25℃)留样结果表明在6个月内,混悬滴眼液无结块、聚集现象,粒度、pH值、含量、相关物质无显著变化。家兔眼部刺激性实验:无角膜表面损伤现象,无结膜充血、红肿的现象及虹膜组织的任何损伤现象。各项实验结果表明CA混悬滴眼液有良好的生物相容性,眼部用药安全,无眼部刺激性。药效实验:实验结果表明CA混悬滴眼液能够提高患有干眼症家兔的SIT值,促进眼表的愈合,对于干眼症的治疗具有良好的效果。结论:新方法制备CA-HPMC固体分散体可以避免使用二氯甲烷,并且由CA固体分散体制得的混悬滴眼液粒度小,粒径分布范围窄,再分散性好,物理和化学稳定性良好,无凝集现象发生,制备工艺简单且重现性好,对眼睛无刺激性,可增加泪液分泌,促进眼表的愈合,对干眼症具有良好的疗效。