东北刺人参(Oplopanaelatus Nakai)是五加科、刺参属的多年生灌木植物,其药用功效和化学成分与人参类似,因此而有“木本人参”的美称。据民族医药专著记载,其有补阳、通络、止咳,调理益气,祛瘀,等功效,近代的研究中发现东北刺人参在调节免疫力、提高代谢、调节血压血糖、抑制癌症、虚咳久嗽、外邪侵袭经络等方面也有良好的治疗效果,尤其在抗癌方面备受关注。刺人参中含有多种化学成分,其中主要活性成分为刺人参皂苷属于五环三萜类皂苷,在其根及根状茎中含量较高,极具药用价值,广阔的应用前景。由于刺人参野生资源匮乏、人工栽培技术尚未成熟、生物反应器培养的刺人参不定根皂苷含量较低等,所以如何提高东北刺人参中活性成分皂苷的含量,增强其生物活性成为研究的热点。近年来,有关植物内生菌的研究表明,内生菌参与植物次生代谢产物的转化合成,而且还能独立产生次生代谢产物,是发现新药及先导化合物的不竭来源。因此,本研究从东北刺人参中分离内生菌菌株,利用内生菌生物转化作用提高东北刺人参根中活性成分总皂苷含量。本研究采用平板培养和四区划线等方法,从东北刺人参中分离和纯化刺人参内生菌,并利用内生菌对刺人参进行液体发酵,得到刺人参发酵产物,最后用分光分度法测定总皂苷的含量,探讨微生物菌株接种量、发酵温度、和发酵pH值对发酵产物的影响,优化发酵条件。从东北刺人参中分离得到78种刺人参内生菌,从中筛选出3种高活性菌株,分别为菌株PDA7、NA22和NA23。发酵实验结果显示,菌株PDA7发酵1天后,刺人参皂苷含量达到最高值54.597 μg/mL;菌株NA22发酵11天后,刺人参皂苷含量达到55.339 μg/mL。菌株NA23发酵11天后,刺人参皂苷含量达到最56.347 μg/mL。液体发酵刺人参工艺最为有利的条件为:发酵温度为30℃,发酵初始pH为7.0,内生菌接种量为10%。最后,通过16S rDNA序列分析法对高活性内生菌株进行鉴定,鉴定结果菌株 PDA7 为Bacillus subtilis;菌株 NA22 为 Agrococcus citreus;菌株 NA23 为Bacillus pumilus。