猪细小病毒（Porcine parvovirus，PPV）是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一，同时能够引起断奶仔猪的多系统衰竭综合症。PPV感染怀孕母猪特别是初产母猪之后，主要表现为胎儿和胚胎死亡，产出死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪，还能引起仔猪非化脓性心肌炎、皮炎症状和消瘦性综合征。PPV主要是通过呼吸道、消化道和胎盘传播，母猪、公猪和持续性感染的外表健康猪都可传播该病。PPV与猪伪狂犬病毒（PseudorabiesVirus,PRV）、乙型脑炎病毒（Japanese encephalitisvirus,JEV）、猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）等混合感染而加重了其危害。各国猪群血清学调查阳性检出率都比较高，我国也先后在北京、上海、吉林、黑龙江、四川、浙江等地分离到了多株PPV，血清学调查阳性率为80%。由于本病的广泛流行和危害，一直是猪病研究的热点之一。目前对猪细小病毒的研究主要集中在检测方法以及疫苗上，但是该病还是时有发生。而对其氨基酸序列以及空间结构的预测的研究较少，特别是对结构蛋白VP1和非结构蛋白NS1的研究上，本试验从临床上分离得到一株PPV，主要开展了一下几方面的研究：根据NCBI数据库中公布的PPV NS1基因序列，设计了一对引物，利用PCR技术从病料中检测到一株PPV。用双抗（青链霉素）、氯仿、滤膜等处理病料之后，接种于ST细胞盲传数代出现细胞病变。提取细胞毒的核酸，扩增之后连接到pMD18-T Vector送去测序。结果显示：PCR扩增出一条360bp左右目的条带，与预期结果相符；病毒经ST细胞盲传7代之后，细胞出现轻微的拉网、扁圆等细胞病变；测序结果发现，该病毒的核酸序列与其他PPV的核酸序列同源性介于98%-100%之间。扩增出PPV NS1全基因序列，并对其核酸组成、酶切位点、氨基酸组成、氨基酸的理化性质、疏水性、跨膜蛋白、信号肽、二级结构和三级结构进行了预测分析。结果显示，PPV NS1基因序列全长1977bp编码658个氨基酸，基因序列里面GC碱基含量占37.28%，AT碱基含量占62.72%。所含的酶切位点里HpaⅡ和MspⅠ易受到CpG甲基化的影响，DpnⅡ、MboⅠ、AlwⅠ、Eco0109Ⅰ、PpuMⅠ容易受到其他甲基化的影响。20种氨基酸里面苏氨酸所占的比重最高为10.5%，半胱氨酸所占的比重最低为2.6%，亲水区域较疏水区域多，亲水区的能力较疏水区域能力强。该基因所编码的蛋白序列中，没有跨膜蛋白和信号肽，二级结构中α-螺旋结构占28.88%，β-折叠结构占23.25%，无规则卷曲占47.87%，三级结构从立体结构上预测显示了该蛋白更加稳定的模型。利用PCR扩增出PPV VP2基因目的片段，经连接、转化、测序获得PPV VP2全基因序列。并分析PPV VP2基因核酸组成、酶切位点、氨基酸组成、氨基酸的理化性质、疏水性、跨膜蛋白、信号肽、二级结构和三级结构。结果显示，PPV VP2基因序列全长1740bp编码579个氨基酸，核酸序列GC碱基含量38.28%，AT碱基含量占61.72%。酶切位点里HpaⅡ、MwoⅠ、TspMⅠ、AvaⅠ、MspⅠ、BsmFⅠ、SmaⅠ、MspA1Ⅰ易受到CpG甲基化的影响，BaBⅠ易受到其他甲基化的影响。20种氨基酸里面苏氨酸所占的比重最高为11.1%，半胱氨酸所占的比重最低为0.7%，亲水区域和疏水区域区别不明显，二者交替出现，且亲水和疏水的能力相当。编码区的蛋白不存在信号肽和跨膜蛋白区，二级结构中α-螺旋结构占11.74%，β-折叠结构占22.63%，无规则卷曲占65.63%，三级结构显示该蛋白缺少稳定的结构框架。近年来猪细小病毒的感染率呈上升趋势，且多为接种猪细小病毒疫苗之后仍有该病的发生，这种现象的发生是不是因为VP2蛋白的不稳定性造成了其免疫原性和抗原性发生了变化。为初步探究其原因，根据GenBank发表的猪细小病毒的VP2基因序列设计一对特异性引物，扩增出猪细小病毒VP2基因主要的抗原表位片段，并将其克隆到pET-28a表达载体，转化到BL21表达菌里，经IPTG诱导表达出蛋白，SDS-PAGE电泳试验验证结果，为下一步建立猪细小病毒血清学检测方法奠定基础。