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研究背景与目的目前胃癌仍是对人体危害很大的一种高发病率高死亡率疾病。导致胃癌发生的因素有物理因素和化学因素，在我们国家化学因素占主要位置。科研人员支付了大量的精力来研究癌症的生物途径，如细胞凋亡，细胞周期调控，信号转导和恶性转化的细胞模型，其中化学致癌物质的应用为研究肿瘤病因机制开通了另一个新途径[1]。化学致癌物，根据发生的发起和推动两阶段模型，大致可分为两大类，虽然对这一理论的批评仍然存在[2]。因此，正常细胞的恶性转化，可划分为两个阶段：启动和推进[3]。很多科研人员可以通过各种遗传毒性试验很方便的诱导细胞恶性转化启动细胞肿瘤的发展。现在越来越多的化学品被认定为在细胞和动物实验中具有致癌作用，其中最常用的就是N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）。MNNG是一种人工合成的亚硝基化合物，可以造成细胞DNA严重损害的，产生各种病变[4]，诱发细胞癌变。流行病学证据表明，亚硝胺类物质对人体具有致癌性，在我国人们暴露于亚硝胺类饮食的环境中屡见不鲜，事实上亚硝胺类的致癌性已成为一个全球性健康问题[5,6]。许多实验室在试图解决这些问题，使用各种不同的实验系统，进行了详细的研究[7,8]。但是亚硝胺类化学致癌剂对于细胞毒性和致癌性的机制目前尚不清楚。因此对于化学致癌物质的认识我们仍然有很长的路要走。本次试验主要从形态，染色体，蛋白水平对亚硝胺类物质MNNG诱导人胃上皮永生化细胞GES-1系细胞的恶性转化进行研究。为亚硝胺类化学物质的致癌作用提供依据。方法1.利用MNNG作用于GES-1细胞24小时诱导其恶变。2.倒置相差显微镜观察细胞恶变前后形态学变化。3.秋水仙素制备染色体，倒置相差显微镜观察染色体变化。4.利用琼脂糖观察细胞形成集落情况5.免疫组化检测细胞恶变前后PTEN蛋白表达变化情况。结果在一定剂量MNNG诱导GES-1细胞后（命名为MC），在形态上核增大，畸形．核染色质变粗，核仁肥大，核分裂。染色体可见双倍及多倍体，染色体断裂。克隆形成实验可见细胞接触抑制消失克隆形成，两组相比具有统计学意义P<0.05。MC细胞中PTEN蛋白表达明显低于GES-1细胞，2=898.794，P<0.001。结论经一定剂量MNNG诱导GES-1细胞后形态和染色体发生明显恶性变化，细胞之间接触抑制消失，PTEN蛋白在MC细胞中表达下降。诱导前后细胞形态和蛋白水平发生明显变化生，呈现肿瘤细胞的形态学及生长特征。