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目的探讨PKC信号转导通路及Cx43在舒芬太尼预处理乳鼠心肌细胞缺氧/复氧中的作用。方法原代心肌细胞分离培养。将5d的心肌细胞分成八组:正常对照组(C组):细胞培养过程中不给予任何处理;缺氧/复氧损伤组(I/R组):缺氧2h,复氧1h;吗啡预处理组(MF组):吗啡孵育15 min后,除去药物培养20 min,其他同I/R组;舒芬太尼预处理组(SF组):舒芬太尼孵育15 min后,除去药物培养20 min,其他同I/R组;PKC激动剂PMA+吗啡预处理组(PMA+MF组):PMA孵育10min,再进行吗啡预处理,其他同I/R组;PKC抑制剂Rottlerin+吗啡预处理组(ROT+MF组):Rottlerin孵育10 min,再进行吗啡预处理,其他同I/R组;PKC激动剂PMA+舒芬太尼预处理组(PMA+SF组):PMA孵育10min,再进行舒芬太尼预处理,其他同I/R组;PKC抑制剂Rottlerin+舒芬太尼预处理组(ROT+SF组):Rottlerin孵育10 min,再进行舒芬太尼预处理,其他同I/R组。各组做上述相应处理后取材检测细胞存活率、免疫荧光共聚焦技术检测缝隙连接蛋白Connexin 43(Cx43)的平均光密度(AOD)、用Western-blot检测细胞Cx43总蛋白及其磷酸化水平(P-Cx43)的表达量。结果与C组比较,其余各组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值心肌细胞Cx43总蛋白表达及P-Cx43表达降低(P<0.05);与I/R组比较,MF组、SF组、ROT+MF组、ROT+SF组、PMA+MF组、PMA+SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达增高(P<0.05);与MF组比较,ROT+MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白及P-Cx43表达降低(P<0.05),SF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值和Cx43总蛋白降低(P<0.05),而P-Cx43表达增高(P<0.05),PMA+MF组心肌细胞存活率、Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达均增高(P<0.05);ROT+SF组较SF组心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达低(P<0.05),而PMA+SF组较SF组心肌细胞存活率、心肌细胞Cx43 AOD值、Cx43总蛋白和P-Cx43表达高(P<0.05)。结论吗啡和舒芬太尼预处理可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,舒芬太尼对心肌细胞的保护作用较吗啡弱。这种心肌细胞保护作用可能与PKC信号通路的激活有关,并且通过PKC信号通路调节Cx43及其磷酸化表达。