论文部分内容阅读
目的探讨调控TOLL样受体9(TLR9)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路在系统性红斑狼疮(SLE)的意义。方法收集2008年12月至2009年3月我院住院SLE患者35例,均符合1997年美国风湿病学院(ACR)修订的SLE分类标准,其中女性32例,男性3例,年龄15～70岁,平均(38±13)岁。15例正常对照为健康志愿者,其中女性10例,男性5例,年龄13～55岁,平均(37±8)岁。SLE患者均未用过羟基氯喹(HCQ),除外感染。参考美国风湿病学院的SLE疾病活动性指标(SLE disease activity index,SLEDAI)对其疾病活动进行评分,20例患者SLEDAI积分≥10为疾病活动,15例患者SLEDAI积分<10为疾病稳定。分离SLE患者和正常对照外周血单核细胞(PBMC),并以1μmol/L寡脱氧核苷酸(CpG ODN)2216刺激并培养24h,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测刺激前后TLR9、MyD88 mRNA的水平变化,分别比较活动组、稳定组与正常对照组间TLR9、MyD88 mRNA表达水平的差异,分析活动患者TLR9、MyD88 mRNA的表达水平与SLEDAI、补体等指标的相关性;酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中IFN-α水平。10例SLE患者,以1μmol/L CpG ODN2216刺激PBMC培养2h,再加入1μmol/L HCQ培养16h,RT-PCR检测HCQ刺激前后TLR9、MyD88 mRNA的水平变化。结果SLE患者PBMC中TLR9、MyD88 mRNA水平明显高于正常对照(p<0.01);活动患者TLR9、MyD88 mRNA水平明显高于稳定患者(p<0.01);活动患者TLR9 mRNA水平与疾病活动度评分(SLEDAI)正相关(rs=0.471,p<0.05),与C3、C4负相关(rs=-0.479, rs=-0.493,p<0.05)。CpG ODN2216刺激后SLE患者PBMC中TLR9、MyD88 mRNA水平明显升高(p<0.01,p<0.05);活动患者培养上清中IFN-α的水平显著升高(p<0.01)。CpG ODN2216加HCQ组TLR9、MyD88 mRNA水平明显低于无HCQ刺激组(p<0.001)。结论SLE患者TLR9/MyD88信号通路明显活化,CpG ODN2216通过上调TLR9、MyD88 mRNA的表达,诱导pDC分泌IFN-α增加,促进疾病进展。阻断TLR9/MyD88通路活化可能是治疗SLE的一种有效手段。HCQ可能通过下调TLR9、MyD88 mRNA的表达,抑制CpG ODN2216诱导的TLR9/MyD88信号通路活化。