蜂蜜是一种传统的天然保健食品,其中含有糖类、蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素、有机酸、色素、蜂花粉、激素、微量活性成分等。蜜源不同,蜂蜜中的各种组分和含量不同;即使是同一种类的蜂蜜,由于受气候条件、土壤性质、养蜂技术等诸多环境因素的影响,也极少出现有完全相同成分和相同含量的分析结果。因此,可以根据蜂蜜中有效成分的种类和含量的差异,建立蜂蜜质量控制方法。本文将HPLC指纹图谱技术应用于洋槐蜂蜜中糖类物质和黄酮类化合物的分析,拟建立一种科学、高效、准确的蜂蜜种类鉴别和质量控制的检测方法。洋槐蜂蜜的糖类化合物HPLC指纹图谱研究采用氨基色谱柱、示差折光检测器、乙腈-水（75:25）为流动相、柱温37℃、检测器40℃、进样量25μL、流速为1.0mL/min等色谱条件,建立了具有较强特征性和专属性的洋槐蜂蜜糖类化合物HPLC指纹图谱:确定了果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖等4个稳定性较好的特征峰和1个具有重要参考价值的位于蔗糖和麦芽糖之间的色谱峰;对25个供试品分析得出:果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖总含量均高于70%,其中果糖和葡萄糖总量在65%以上,蔗糖含量均在2%以下;对采自陕西、浙江、广西、山东、甘肃和湖北6个省不同年份的供试样品研究发现,就洋槐蜂蜜果糖和葡萄糖总量而言,2007年采集的样品均比2006年的样品含量高,其中湖北省年份间差异最大:不同省份间对比结果表明,陕西、甘肃和湖北样品单糖含量较高,但差异不明显,浙江和广西样品含量较其他省份样品低。掺假实验结果表明,加入饴糖,出现了一个新的未知峰,保留时间为18.189,且麦芽糖含量大于6%;根据文献资料,结合国标GB18796-2005,我们建议:采用HPLC法检测洋槐蜂蜜质量时,若出现保留时间为18.189的色谱峰和麦芽糖含量高于6%,则可判定为不符合标准产品。洋槐蜂蜜黄酮类化合物提取实验,以黄酮的吸附量和解吸率为指标,从DM130、NAK-9和XAD-23种大孔吸附树脂中选取了吸附解吸特性较好的XAD-2;最佳提取工艺参数为:供试样液pH值控制在3较好,上样速率以1mL/min为宜,以70%乙醇洗脱时,XAD-2大孔树脂的吸附量为20.12mg/g湿树脂。洋槐蜂蜜黄酮类化合物指纹图谱的研究,色谱条件确定为:色谱柱为Hypersil BDS C₁₈（4.6×250mm,5μm）:流动相A为水:甲酸（95:5）,流动相B为甲醇;梯度洗脱程序为0～15min,甲醇体积分数为30%,15～20min,由30%增至40%,20～30min,由40%增至45%,30～50min,由45%增至60%,50～52min,由60%增至80%,52～60min,恒定为80%:流速为1.0mL/min;检测波长为340nm;进样量为25μL;由25种供试样品色谱图得出:我国的洋槐蜂蜜黄酮类化合物的种类和含量存在差异;HPLC指纹图谱有7个特征峰和1个保留时间为47.09的具有重要参考价值的色谱峰;根据相对保留值确定供试样品中含有芦丁、槲皮素和山奈酚。对采自陕西、浙江、广西、山东、甘肃和湖北6省的不同年份的样品进行对比得出:供试样品黄酮类化合物的种类和含量均有所不同,芦丁、槲皮素和山奈酚的含量分别为7.29～42.31μg/100g、2.61～70.51μg/100g和2.97～110.63μg/100g;就同省的不同年份的供试样品黄酮类化合物含量而言,除广西样品含有的芦丁和甘肃省样品含有的槲皮素外,2006年3种黄酮类化合物的含量均不同程度的高于2007年样品含量;不同产地含量对比发现,采自山东的供试样品芦丁、槲皮素和山奈酚总量最高,其次为甘肃、陕西样品,湖北样品含量最少。由于洋槐蜂蜜成分的差异主要受气象条件和生态条件差异影响,其中气候条件包括温度和降水等。根据气象资料显示,2006年春季（3月～5月）全国气温偏高,降水较多,时空分布极不均匀,日照偏多。在一定程度上解释了同省份2007年采集的样品比2006年的样品单糖含量高这一试验结果。据Bell报道,黄酮类化合物是植物在逆境中抵抗压力所产生的一种防御物质。2006和2007年（3月～5月）温度和降水资料,同样可以解释供试样品中2006年样品较2007年样品黄酮类化合物含量高的现象。而地域上日照分布的差异,对蜂蜜黄酮类化合物的含量也有影响。本实验为进一步研究提出问题:位于蔗糖和麦芽糖色谱峰之间的1个共有峰所指代的具体物质:洋槐蜂蜜黄酮类化合物的除已知峰外的其他4个特征峰,拟采用内标法或HPLC-MS联用技术进一步分析。通过解决问题、再提出问题,本论文可为蜂蜜指纹图谱研究提供实验依据,为其种类鉴别、质量检测和管理提供参考方法。