论文部分内容阅读
目前，脑血管疾病是当今三大死亡原因之一，其死亡率约为30％，且发病率仍有上升趋势。因此，研究有效预防脑血管疾病发生和最大程度减少可预见的脑缺血/再灌注损伤的方法和机制成为医学界的重点和难点。 在我国，采用中医针灸治疗脑猝中已有上千年的历史。由于其疗效显著，至今仍广泛应用于临床。近年来，医学研究者将传统针灸与电流刺激相结合，进一步提高了治疗效果。我科研究者用电流强度1mA，频率2/15Hz的疏密波电针灸大鼠“百会穴”(30min/d×5d)，发现对预处理后24h大脑中动脉栓塞(2h)引起的脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用[熊利泽等，2001]。鉴于该研究结果，本研究拟利用大鼠局灶脑缺血模型(MCAO)深入探讨电针灸预处理的特点及保护机制，为寻找适用于临床的预处理脑保护方法探索新路径。 目的： 1．探讨电针灸诱导脑缺血耐受的“穴位特异性”，即电针灸刺激“百会穴”与旁开“百会穴”1.0cm的非穴位位置后，两者是否具有相同的预处理脑保护效应。 2．比较不同频率电针灸(2/5Hz、2/15Hz、2/100Hz)重复刺激“百会 第四军医大学硕士学位论文穴”的预处理脑保护效果，寻找理想的电针灸频率： 3．探讨电针灸的预处理作用与内源性阿片受体的关系，寻找电针灸诱导产生脑缺血耐受的相关机制。方 法： 1．“百会穴”在电针灸预处理诱导脑缺血耐受中的作用研究 40只 SD雄性大鼠，随机分为四组…叫，即空白对照组（ControlX戊巴比妥对照组（PB、电针灸“百会穴”组爬A）和电针灸“百会穴”穴位旁开组爬 卜Control组未行任何处理；PB组腹腔注射戊巴比妥钠40mg／kg，连续5天；电针灸EAI组和EAZ组在戊巴比妥钠麻醉下分别用重复电针灸刺激＊0minjd X sd）“百会穴”和“百会穴”旁开 1刀cm处。最后一次处理的24h后，所有动物在异氟醚麻醉下用颈内动脉线栓法致右侧大脑中动脉栓塞 120min。再灌注24h后，行神经功能障碍评分，并取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积。 二．不同频率对电针灸预处理诱导脑缺血耐受程度的影响 SD雄性大鼠48只，随机分为4组（f叫＞ 即戊巴比妥对照组oBX 电针灸2／SHz、2八 和y 组。PB组腹腔注射戊巴比妥钠40mg／kg／次，连续5天；电针灸组在戊巴比妥钠麻醉下根据组别分别用2／SHZ、2／15HZ或2八 频率的疏密波刺激O0min／dX5d厂‘百会穴”。最后一次处理24h后，所有大鼠在异氟醚麻醉下用颈内动脉线栓法致右侧大脑中动脉栓塞120min。再灌注24h后，行神经功能障碍评分，并取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积。 3．纳络酮对电针灸诱导大鼠脑缺血耐受作用的影响 40只SD雄性大鼠，随机分为4组（n＝1X 即戊巴比妥钠对照组oB卜纳络酮＋戊巴比妥钠组（NX）、电针灸2／l HZ组（EA）和电针灸2／l HZ十纳络酮组（＊E）。PB组每天腹腔注射戊巴比妥钠40二吵g：＊X组每天 －2－ 第四草医大学硕士学位论文腹腔注射纳络酮lm叭g和戊巴比妥40mg／kg；EA和NE组每天在戊巴比妥钠O0m叭g）麻醉下接受2／1 SHz频率电针刺激o0min／d x sd广‘百会穴”，NE组在麻醉前10min腹腔注射纳络酮ling／kg。所有动物都被连续处理sd，末次处理24h后，在异氟醚麻醉下用颈内动脉线栓法阻闭右侧大脑中动脉120ndn。恢复灌注24h后评估神经功能障碍，并取大脑行TTC染色以测量脑梗死容积。结 果： 1．“百会穴”在电针灸预处理诱导脑缺血耐受中的作用研究 EA组的神经功能障碍评分优于COniOOI组和PB组…功乃5），与EAZ组比较无差异。EAZ组、C。nrol组和PB组的神经功能障碍评分无显著差异。＊Al组的脑梗死容积较其他三组显著减少o刃．05卜＊A二组的梗死容积较Control组和PB组显著减小O＜0刀5卜Control组和PB两组间的梗死容积无差异（P＞o刀5）。 2．不同频率对电针灸预处理诱导脑缺血耐受程度的影响 3组电针灸组神经功能障碍评分均低于PB组O＜0．05卜 2门 组评分明显低于2／SHZ和2＊ 组b＜0刀5卜2乃 和2／100HZ两组间评分无差异O＞0刀5卜3组电针灸组的脑梗死容积均明显小于PB组b＜0刀5X2／l SHZ组的脑梗死容积明显小于2乃 和2／100HZ组 （＜0刀5卜 2乃 和2／100HZ两组间脑梗死容积无统计学差异（P＞刀5卜 3．纳络酮对电针灸诱导大鼠脑缺血耐受作用的影响 EA组神经障碍评分明显低于其它3组O0．05），NE组、PB组和NX组间的评分无差异O＞O．05卜＊A组脑梗死容积最小，较其他3组均有统计学差异…＜0乃1卜＊E组的梗死容积小于＊X组和PB组O＜0刀1XPB组和＊X组的梗死容积无差异O＞0刀5卜结 论： －3－ 第四军医大学硕士学位论文 1．重复电针灸刺激“百会穴”＊0ndn／d X sd）对大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的预处理保护作用具有穴位特异性。 2．三种频率的电针灸预处理＊0min／d