苦瓜多糖和皂苷的提取纯化及对乳腺癌细胞MCF-7作用机理研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:melaniezhao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
苦瓜具有一定的食疗和药理功效,苦瓜多糖和苦瓜皂苷类物质更是具有一定的功能作用,他们具有一定的降血糖,增加抵抗力,抗病毒以及抗癌等功效。而乳腺癌在女性人群中最为常见,是及其难以治愈的疾病,也是导致死亡的原因之一。采用苦瓜多糖和皂苷对乳腺癌细胞MCF-7进行作用,可以有效地降低乳腺癌细胞MCF-7的增值,尤其是苦瓜皂苷作用更佳。  本论文以苦瓜多糖和皂苷为研究对象,通过大孔吸附树脂对苦瓜多糖纯化进行响应面优化试验,研究洗脱剂浓度、上样体积和洗脱剂用量对苦瓜多糖纯化效果的影响,并确定了优化的最佳工艺参数;采用泡沫分离技术对苦瓜皂苷进行进一步的纯化,研究不同物质量浓度、PH和温度对纯化效果的影响,通过正交试验确定最佳的纯化工艺条件;采用MTT法研究苦瓜多糖和苦瓜皂苷对乳腺癌细胞的增值抑制效果,并进一步应用HE染色、流式细胞技术和western-blot方法,对苦瓜皂苷抑制乳腺癌细胞增值机理进行了进一步的探讨。通过以上实验得出以下结论:  (1)通过对苦瓜多糖的纯化研究可知:在室温条件下多糖上样的质量浓度为2.0mg/mL,多糖上样体积为3BV,洗脱剂浓度为50%,洗脱剂体积为2BV时,纯化效果最好,多糖含量从26.01%提高到66.5%。纯化前后苦瓜多糖中蛋白质含量分别为4.12%和5.60%,水分含量分别为19.2%和18.9%。纯化后苦瓜蛋白含量反而增加,水分含量基本保持不变。  (2)通过对苦瓜皂苷的纯化研究可知:在物质量浓度为1.6mg/ml、PH为7.5和温度为30℃时,对苦瓜皂苷的纯化效果最好,纯度为92.8%;定性实验验证所提取的物质为皂苷类物质;经HPLC图谱分析,确定所提的苦瓜皂苷成分与张玉婵等提取的皂苷成分一致。说明苦瓜皂苷提取纯化技术的稳定性。  (3)MCF-7增殖抑制试验结果表明:糖纯度为26.01%,多糖作用浓度200μg/ml时,对MCF-7的抑制率达到最大值,为49.5%;多糖纯度为66.5%,多糖作用浓度仅为6.25μg/ml,对MCF-7的抑制率可达到最大值,为46.5%。纯化后的苦瓜多糖用量比纯化前的用量显著降低。这与苦瓜多糖的纯度有直接的关系;苦瓜皂苷对乳腺癌细胞的作用呈现时间和剂量依赖性,经24h和48h作用后,抑制率随剂量的增加而增大,且当苦瓜皂苷作用浓度达到500μg/ml时,两个不同作用时间段的抑制率相差不大,最佳抑制率为86%。  (4)HE试验结果表明,皂苷作用后的细胞呈现明显的胞浆浓缩、细胞质连接不紧密,细胞变小,核破碎,并有凋亡小体出现;经流式细胞术可检测到细胞周期的变化,经皂苷作用后,细胞凋亡率增加,细胞S期数目也显著增加,G1、G2期数目有所下降,且G2期数目下降更显著,这说明皂苷将细胞主要阻遏在S期。  (5)Western-blot试验进一步对皂苷的作用机理进行了研究,经研究随着苦瓜皂苷浓度的增加抗凋亡蛋白bcl-2的表达越少,所以皂苷是通过抑制抗凋亡蛋白bcl-2的表达来增加乳腺癌细胞MCF-7的凋亡的。
其他文献
国内外研究及运行经验均表明,电力系统过电压是造成电力系统设备故障,引起停电事故的主要原因之一。研究确定变电站系统过电压水平及其特征,确定绝缘配合水平,对限制过电压水平,保
该文的工作是电力部重点科研项目"±20Mvar新型静止无功发生器(Advance Static Var Generator,ASVG)的研制"研制工作的一部分,目前该装置已在洛阳市电业局朝阳220KV变电站成
新冠肺炎来势汹汹,几天便席卷了中国,芙蓉园中,大雁塔下,曲江池畔,游人绝迹,一时间人心惶惶.rn鸟语花香,七彩滇池,微风不燥,阳光正好,呼吸着大自然的气息,身心舒畅.“新冠来
期刊
摘 要:随着素质教育的不断推行,教育需要更加具有多样性与创新性才能够提高学生的学习兴趣,达到教育目的。英语课程的教学一直以来都是难题,除了教学效果的提高较难,当前在英语课堂上还有许多问题需要解决,例如如何提高学生的学习积极性与主动性,如何激发学生的参与欲,何如有效培养学生的英语语感与对英语的喜爱。这些问题在初中英语教学中影响着实际的教学效益,需要得到具体的解决才能够保障英语教学的有效性。  关键词
电力系统动态行为数值仿真是了解电力系统在遭受扰动后能否保持稳定的一种方法.对传统的计算方法来说,在对系统动态全过程进行仿真时,经常要根据仿真时间的不同进行数学模型
该论文对TCSC及其晶闸管触发策略对SSR的抑制作用进行了研究.论文首先介绍了TCSC的基本结构、运行特性和运行方式,研究了TCSC控制器的分层设计和触发控制系统的模型.并对SSR
乡村振兴战略中包含了五大振兴要求,这五大振兴相互关联,相互促进,是一个有机整体.乡贤文化在五大振兴中具有积极的促进作用,是实现五大振兴的有效载体.本文重点阐述乡村振兴
在我国经济不断发展的过程中,有关交通建设的工作也在蓬勃的进行发展,城市交通设施的建设工作也在不断的完善.城市在不断地发展过程中,交通拥堵的现象也是日益严重,地铁的修
该文阐述连续时间动态系统的平衡点分岔理论和数值算法在电力系统非线性稳定分析中的应用.在工程实际中,大多数系统都运行在某一平衡点,显然,系统只能在一定的边界范围内使得
电动汽车的发展可以有效减少传统燃油汽车的使用数量,缓解城市污染,减少社会对化石燃料的依赖。然而随着电动汽车数量的快速增加,充电设施数量也将急剧增加,其现有的充电设施工作