细胞骨架相关蛋白4（cytoskeleton associated protein 4,CKAP4）是一种II型跨膜蛋白,主要存在于内质网上维持内质网的稳定。同时发现CKAP4在质膜上也有定位,作为蛋白相关抗增殖因子（antiproliferative factor,APF）、表面活性剂蛋白A（surfactant protein-A,SP-A）、组织纤溶酶原激活剂（tissue plasminsogen activator,t PA）、分泌蛋白（Dickkopf 1,DKK 1）等多种蛋白的受体参与疾病的发生过程。CKAP4在胰腺癌、肺癌、肾癌、食管鳞状细胞癌细胞中,可能通过激活PI3K/AKT途径促进正常细胞和癌细胞的增殖,然而又有报道称CKAP4在肝细胞癌中可能作为抑癌因子抑制Wnt通路的发生,CKAP4抑制肝癌细胞的转移并与良好的预后性有关。CKAP4作为多种癌症的诊断标志物或治疗靶点被广泛的研究。在实验室的大鼠全基因组芯片Rat Genome 230 2.0数据库中,我们发现Ckap4在2/3肝切除（partial hepatectomy,PH）后的12 h-72 h时显著上调表达,即在PH后肝再生的增殖期显著上调,表明Ckap4在肝再生进程中与肝细胞的增殖密切相关。然而目前对CKAP4在肝再生中的调控作用鲜有报道。因此,本文以大鼠正常肝细胞BRL-3A为研究对象,探究CKAP4对肝细胞的增殖影响及作用机制。首先,本文通过构建CKAP4重组过表达质粒,以慢病毒介导的方式获得CKAP4过表达的BRL-3A细胞系。通过RT-q PCR和Western Blot检测CKAP4的过表达效率;同时采用免疫荧光技术检测CKAP4的荧光表达强度。采用MTT、CCK8、Western Blot、流式细胞术等方法,检测CKAP4上调表达对细胞活力、增殖及细胞周期的影响。结果显示,CKAP4过表达使BRL-3A细胞活力增强,细胞增殖和细胞周期显著加快。其次,通过转染siRNA敲降CKAP4的表达,同样采用上述方法检测,实验结果表明CKAP4下调表达导致BRL-3A细胞的活力和增殖受到抑制,与CKAP4上调表达的实验结果相一致。为了进一步说明CKAP4在BRL-3A细胞中调控细胞增殖的作用机理,采用LY294002处理CKAP4过表达和敲降的BRL-3A细胞,并用MTT、CCK8和流式细胞术检测细胞的增殖活力变化,结果显示细胞的增殖、活力和周期都受到抑制,并且CKAP4敲降后的抑制作用更显著。Western Blot结果显示无论在CKAP4过表达组还是敲降组,p-PI3K（p58α）和p-AKT（Ser 473）均下调表达,并且在CKAP4敲降组中p-PI3K（p58α）和p-AKT（Ser 473）的表达量显著降低。综上所述,我们发现CKAP4的表达变化与大鼠肝细胞BRL-3A的增殖相关,CKAP4高表达能够促进BRL-3A细胞的活力和增殖,而CKAP4下调表达使BRL-3A细胞的增殖受到抑制,CKAP4可能通过PI3K/AKT途径调控肝细胞的增殖。