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目的：去整合素和金属蛋白酶10（ADAM10）是ADAM蛋白质家族成员之一，它是具有多个结构域的跨膜蛋白酶，能够水解30余种跨膜蛋白质分子，如淀粉样前体蛋白（APP）、钙粘蛋白等。有研究表明，ADAM10与突触的发生和功能有关，在突触信号传递过程中，可溶性N-乙酰基马来酰胺敏感因子结合蛋白（SNAREs）是一种重要的复合物，其主要成分包括小突触囊泡膜蛋白（VAMP-2)，突触前膜蛋白(Syntaxin-1)，突触小体相关蛋白(SNAP-25)，它在囊泡运输中发挥了关键性的作用。据报道，ADAM10基因缺失导致突触后膜发生异常，树突棘形态改变，影响神经细胞的信号传递。但是，目前对突触前膜是否造成影响尚未见报道。为此，我们利用成年ADAM10条件性基因敲除（cKO）小鼠，研究小鼠大脑中VAMP-2，Syntaxin-1和SNAP-25的表达变化，以及对小鼠的行为可能产生的影响。
方法：利用PCR的方法鉴定转基因小鼠的基因型。ADAM10cKO纯合子作为实验小鼠，野生型C57BL/6J作为对照小鼠。采用Western blot技术，测定12月龄ADAM10cKO（n=4）和对照小鼠（n=4）大脑皮层、海马和小脑中VAMP-2，Syntaxin-1和SNAP-25蛋白质的含量，分析ADAM10基因缺失对它们表达的影响。通过免疫荧光技术检测12月龄ADAM10cKO（n=4）和对照小鼠（n=4）大脑皮层和海马CA1、CA3、DG区的VAMP-2，Syntaxin-1和SNAP-25的荧光表达变化，探究ADAM10缺失对其产生的影响。利用高架十字迷宫和旷场实验研究12月龄ADAM10cKO（n=10）和对照小鼠（n=10）的行为变化，并用SMART2.0软件系统对小鼠的行为学数据进行分析。使用Image J软件对Western blot曝光结果进行灰度值分析，用SPSS软件对实验数据进行统计学显著性分析。
结果：Western Blot实验结果表明，与对照小鼠相比，在ADAM10cKO小鼠大脑皮层中，VAMP-2和Syntaxin-1的表达水平分别降低29.3%(p＜0.001)和6.18%(p<0.05)，SNAP-25无明显改变（p＞0.05)；在海马中，VAMP-2和Syntaxin-1的表达水平分别降低12.63%(p＜0.05)和3.88%(p<0.05)，SNAP-25增加66.58%(p＜0.001)；在小脑中，这三种蛋白质的表达水平均无明显变化（p＞0.05）。免疫荧光实验的结果显示，与对照小鼠相比，在ADAM10cKO小鼠大脑皮层、海马CA1、CA3和DG区中，VAMP-2和Syntaxin-1的分布减少、荧光强度减弱，SNAP-25的分布增多、荧光强度增强。高架十字迷宫实验结果表明，与对照小鼠相比，ADAM10cKO小鼠的活动总次数略有增加（p=0.07），进入开臂次数、开臂滞留时间和开臂滞留时间%均有显著性增加（p＜0.05）。在旷场实验中，与对照小鼠相比，ADAM10cKO小鼠的中央爬行距离%略有降低（p=0.06），进入中央格次数和中央滞留时间均显著减少（p＜0.01和p＜0.05），而外周滞留时间明显增加（p＜0.05）。
结论：ADAM10基因缺失引起小鼠大脑中VAMP-2，Syntaxin-1在皮层、海马的表达水平明显降低；SNAP-25在海马中的表达水平显著增高，说明ADAM10基因缺失对突触前膜造成一定的损伤，影响了神经递质的信号传递，导致小鼠的焦虑情绪减弱，探索能力显著下降。综上所述，ADAM10在维持突触正常功能方面发挥了重要的作用。
方法：利用PCR的方法鉴定转基因小鼠的基因型。ADAM10cKO纯合子作为实验小鼠，野生型C57BL/6J作为对照小鼠。采用Western blot技术，测定12月龄ADAM10cKO（n=4）和对照小鼠（n=4）大脑皮层、海马和小脑中VAMP-2，Syntaxin-1和SNAP-25蛋白质的含量，分析ADAM10基因缺失对它们表达的影响。通过免疫荧光技术检测12月龄ADAM10cKO（n=4）和对照小鼠（n=4）大脑皮层和海马CA1、CA3、DG区的VAMP-2，Syntaxin-1和SNAP-25的荧光表达变化，探究ADAM10缺失对其产生的影响。利用高架十字迷宫和旷场实验研究12月龄ADAM10cKO（n=10）和对照小鼠（n=10）的行为变化，并用SMART2.0软件系统对小鼠的行为学数据进行分析。使用Image J软件对Western blot曝光结果进行灰度值分析，用SPSS软件对实验数据进行统计学显著性分析。
结果：Western Blot实验结果表明，与对照小鼠相比，在ADAM10cKO小鼠大脑皮层中，VAMP-2和Syntaxin-1的表达水平分别降低29.3%(p＜0.001)和6.18%(p<0.05)，SNAP-25无明显改变（p＞0.05)；在海马中，VAMP-2和Syntaxin-1的表达水平分别降低12.63%(p＜0.05)和3.88%(p<0.05)，SNAP-25增加66.58%(p＜0.001)；在小脑中，这三种蛋白质的表达水平均无明显变化（p＞0.05）。免疫荧光实验的结果显示，与对照小鼠相比，在ADAM10cKO小鼠大脑皮层、海马CA1、CA3和DG区中，VAMP-2和Syntaxin-1的分布减少、荧光强度减弱，SNAP-25的分布增多、荧光强度增强。高架十字迷宫实验结果表明，与对照小鼠相比，ADAM10cKO小鼠的活动总次数略有增加（p=0.07），进入开臂次数、开臂滞留时间和开臂滞留时间%均有显著性增加（p＜0.05）。在旷场实验中，与对照小鼠相比，ADAM10cKO小鼠的中央爬行距离%略有降低（p=0.06），进入中央格次数和中央滞留时间均显著减少（p＜0.01和p＜0.05），而外周滞留时间明显增加（p＜0.05）。
结论：ADAM10基因缺失引起小鼠大脑中VAMP-2，Syntaxin-1在皮层、海马的表达水平明显降低；SNAP-25在海马中的表达水平显著增高，说明ADAM10基因缺失对突触前膜造成一定的损伤，影响了神经递质的信号传递，导致小鼠的焦虑情绪减弱，探索能力显著下降。综上所述，ADAM10在维持突触正常功能方面发挥了重要的作用。