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目的:通过观察α7nAchR激动剂(PHA568487)在胆碱能抗炎通路(Cholinergic Anti-inflammatory Pathway,CAP)中对体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)致大鼠肠屏障损伤的影响,旨在探讨其肠屏障的保护作用及可能机制。方法:由沈阳军区总医院动物科研中心提供的成年雄性SD大鼠96只(重量450±50g),随机(数字表法)分为4组,即假手术组(S组)、体外循环组(C组)、α7n ACh R激动剂(PHA568487)+CPB组(CP组)、α7n ACh R激动剂(PHA568487)+α7n Ah R阻断剂(Methyllycaconitine,MLA)+CPB组(CPM组)。每组按4个采血时间再随机分成4个亚组,分别为CPB开始前(T0),停CPB即刻(T1),CPB后2h(T2),CPB后6h(T3),每个亚组再随机分配6只实验鼠。对禁食(6h)的大鼠腹腔内注射10%水合氯醛300mg/kg实施麻醉。建立大鼠CPB模型,S组只置管不转流,C组置管后进行体外循环,CP组在转流前30min给予PHA568487(0.8mg/kg)进行腹腔注射,CPM组给予PHA568487(0.8mg/kg)进行腹腔注射,于30min后给予MLA(6mg/kg)进行腹腔注射。分别于T0、T1、T2、T3各时点取处死大鼠的腔静脉血,经ELISA法测定血清肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化;同时采用Western-blot法检测肠上皮闭锁蛋白(Occludin)和斑块蛋白(ZO-1)的表达;制作肠组织石蜡切片,并于光镜下观察其形态病理学变化;取器官(MLN、肝、肾、肺)组织匀浆以及腔静脉血进行细菌培植,并计算肠道细菌移位率。应用SPSS19.0数据统计软件对实验结果进行分析,所有计量资料按均值±标准差(X±SD)表示,组内比较采用重复测量方差分析,组间比较采用单因素方差分析,计数资料比较应用χ2检验,p<0.05为差异有统计学意义。结果:1、光镜结果显示,S组肠黏膜排列整齐,变化不明显;C和CPM组肠道黏膜损伤严重,可见其变薄,绒毛萎缩、变性、脱落以及坏死,严重部分可见水肿甚至出血;CP组肠道黏膜损伤明显减轻,仅见黏膜下层毛细血管轻度充血,黏膜上皮轻度脱落以及腺体轻度扩张。2、血清IL-6和TNF-a水平的变化:与S组相比,C组、CP组和CPM组在T1~T3三个时点的IL-6和TNF-a水平水平均明显升高,其差异有统计学意义(p<0.05)。与C组相比,CP组与CPM组在T1~T3三个时点的IL-6和TNF-a水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。CPM组在T1~T3三个时点和CP组相比其水平有升高,差异有统计学意义(p<0.05)。3、血清D-乳酸、DAO和I-FABP水平的变化:与S组相比,C组、CP组和CPM组在T1~T3三个时点的血清D-乳酸、DAO和I-FABP水平均显著升高,差异有统计学意义(p<0.05)。与C组相比,CP组、CPM组在T1~T3三个时点的三种指标水平均明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。CPM组在T1~T3三个时点与CP组相比较,三种指标水平均有升高,差异有统计学意义(p<0.05)。4、肠上皮Occludin蛋白和ZO-1蛋白表达的变化:与S组相比,CP组、C组、CPM组在T1~T3三个时点的两蛋白表达均降低,差异有统计学意义(p<0.05)。与C组相比,CP组和CPM组在T1~T3三个时点的两蛋白表达均有所增加,差异有统计学意义(p<0.05)。CPM组在T1~T3三个时点与CP组相比较,两种蛋白表达均有降低,差异有统计学意义(p<0.05)。5、远隔脏器细菌移位率:与S组相比,C组、CP组及CPM组T2时的细菌移位率均明显增高,差异有统计学意义(p<0.05)。与C组相比,CPM组与CP组细菌移位率均有降低,差异有统计学意义(p<0.05)。而CPM组的细菌移位率又明显高于CP组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1、α7nAchR激动剂可在一定程度上减轻CPB导致的大鼠肠黏膜屏障损伤;2、α7nAchR激动剂的肠屏障保护机制可能与激活CAP途径来抑制炎症反应及上调肠上皮紧密连接蛋白表达有关。