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目的:一、从mRNA水平及蛋白质水平研究B7家族成员表达与胃癌的关系,探讨其是否可以作为胃癌免疫治疗的潜在靶点。二、研究B7家族成员蛋白表达与胃癌临床指标的相关性方法:一、收集弋矶山医院2016年3月-2016年12月胃癌手术新鲜切除标本76例,取癌组织作为实验组及距癌组织边缘5cm以上的癌旁胃组织作为对照组。标本离体后分为两部分,一部分(约600mg)离体后立即放入装有RNA保护液的5mlEP管中,放常温保存,以Q-PCR检测胃癌(实验组)及癌旁组织(对照组)中B7家族10个成员cDNA表达水平,比较各成员癌组织及癌旁组织的表达差异性;一部分备用。二、收集我院2011-2012年间胃癌患者160人的蜡块行免疫组化,分析B7-1、B7-2、B7-DC、B7-H2、B7-H3、B7-H6、B7-H7蛋白表达与临床指标(年龄、性别、浸润深度、淋巴结转移、分化程度、肿瘤大小、分期、生存时间)的关系,探讨其相关性。结果:1免疫组化结果1.1 B7-1蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织中B7-1表达明显低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。与患者生存时间无相关性。1.2 B7-2蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织中B7-2表达及癌旁正常组织均高表达,差异无统计学意义(p>0.05)。B7-2表达水平与患者的年龄、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤分期、癌灶大小临床病理参数均无相关性,与性别有一定相关性,男性病人在胃癌组织中B7-2蛋白表达高于女性病人(P<0.05)。与患者生存时间亦无相关性。1.3 B7-H2蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织与癌旁正常组织中B7-H2均高表达,差异无统计学意义(P>0.05)。B7-H2表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期、癌灶大小临床病理参数均无相关性,即不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、临床分期、癌灶大小不同的样本之间,B7-H2表达水平无明显差异,与患者生存时间亦无相关性。1.4 B7-H3蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织B7-H3表达较癌旁正常组织明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。B7-H3表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期临床病理参数均无相关性,即不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、临床分期不同的样本之间,B7-H3表达水平无明显差异。与癌灶大小有相关性,癌灶越大(>5cm),B7-H3蛋白表达越多,与患者生存时间无相关性。1.5 B7-H6蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织表达B7-H6水平较癌旁正常组织明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。B7-H6表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期、癌灶大小临床病理参数均无相关性,即不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、临床分期、癌灶大小不同的样本之间,B7-H6表达水平无明显差异,与患者生存时间亦无相关性。1.6 B7-H7蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织与癌旁正常组织中B7-H7均高表达,差异无统计学意义(P>0.05)。B7-H7表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期、癌灶大小临床病理参数均无相关性,即不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、临床分期、癌灶大小不同的样本之间,B7-H7表达水平无明显差异,与患者生存时间亦无相关性。1.7 B7-DC蛋白表达定位于胃黏膜腺体中的细胞膜及细胞质。胃癌组织较癌旁正常组织中B7-DC表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。B7-DC表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、肿瘤临床分期、癌灶大小临床病理参数均无相关性,即不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结有无转移、临床分期、癌灶大小不同的样本之间,B7-DC表达水平无明显差异,B7-DC表达阴性与患者生存时间呈正相关(P<0.05)。2 Q-PCR实验结果基因的相对表达量用比较CT值计算,计算公式:F=2-ΔΔCT,ΔΔCT值=(胃癌组目的基因CT值-胃癌组内参基因CT值)-(癌旁组目的基因CT值-癌旁组内参基因CT值)。实验结果显示,B7-1:癌组织mRNA表达明显少于癌旁正常组织(p<0.05)。B7-2:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。B7-DC:癌旁组织mRNA表达水平明显高于癌组织(p<0.05)。B7-H1:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。B7-H2:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。B7-H3:癌组织mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(p<0.01)。B7-H4:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。B7-H5:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。B7-H6:癌旁组织mRNA表达明显高于癌组织(p<0.05)。B7-H7:癌组织与癌旁组织mRNA表达无明显差异。3 B7家族成员mRNA表达与蛋白表达一致性分析7个行免疫组化实验的B7家族成员蛋白质及mRNA在癌组织及癌旁组织表达基本一致。结论:B7-1、B7-DC、B7-H6、B7-H3与胃癌发生可能相关,可能是胃癌治疗的潜在靶点。B7-2在性别中表达存在差异,男性癌组织表达高于女性,B7-H3在癌组织中癌灶越大表达越多,B7-DC表达对患者生存时间可能有一定影响。