维吉尼亚链霉菌IBL14中细胞色素P450的鉴定与功能分析

来源 :安徽大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jianjian19527
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
维吉尼亚链霉菌IBL14是一株从制药厂附近的污泥中筛选得到的,它能够有效的转化和降解甾醇类化合物,包括:孕酮、皮质醇和胆固醇等。本实验室研究IBL14对薯蓣皂苷元的转化和降解作用,产生11种新的代谢产物和发现了2条新的代谢通路:薯蓣皂苷元C25羟基化和C6双甲氧基化。在这个代谢通路中细胞色素P450起到了重要的作用,为了研究维吉尼亚链霉菌IBL14中细胞色素P450的结构与功能,首先对链霉菌IBL14进行了全基因组测序,测序结果表明链霉菌IBL14的全基因组约80Mb,GC含量高于70%。在全基因注释中预测得到33个细胞色素P450基因,分属于13个细胞色素P450家族,主要分在CYP105、CYP107、CYP191和CYP197家族。在全基因组测序之前,利用分子遗传学技术克隆出了细胞色素P450单氧化酶fcpc基因,它能够催化薯蓣皂苷元C25位羟化,该基因序列与测序预测的svh01序列一致。   IBL14中33个CYPs通过与Streptomyces griseussubsp.Griseus NBRC 13350、Streptomyces avermitilis和Streptomyces sp.Mg1全基因组中的细胞色素P450基因序列比对,表明IBL14与Streptomyces sp.Mg1的遗传关系最近;在这四株菌中CYP105、CYP107和CYP157各家族成员相似性较高;svu001的可能是CYP家族中新发现的成员,在Genbank中仅与Streptomyces sp.Mg1中的一条基因序列有60%的一致性,与其它收录的序列的一致性低于25%。   在预测的所有序列中,经过同家族成员比对,表明几乎所有序列都有典型的细胞色素P450保守序列的结构域:在I螺旋中有保守的氨基酸残基GXXT,螺旋K中保守的EXXR模块,以及保守的半胱氨酸疏水性口袋域。   目前还预测得到IBL14基因组中有9个铁氧还蛋白基因和3个铁氧还蛋白还原蛋白基因。它们与IBL14CYPs的关系:有3个P450基因与铁氧还蛋白基因成簇;svu020与铁氧还蛋白还原蛋白基因和铁氧还蛋白基因两个基因成簇;还有部分CYPs与调控基因和其它功能基因成簇存在。   目前,已经完成了基因svh01在大肠杆菌中的克隆表达,重组菌能够代谢薯蓣皂苷元和炔雌醇;svu022在大肠杆菌中的克隆和枯草杆菌中的表达已经完成。这两种蛋白质都是可溶性的,分子量分别是44KD和45KD。
其他文献
环丙唑醇是一种优秀的三氮唑类杀菌剂。本文以对氯苯甲醛和烯丙基溴为起始原料,经过高烯醇化反应、氧化反应、烯键环丙烷化反应、烯醇负离子的甲基化反应、Corey-Chaykovsky反
  本文阐述了普通干混砂浆生产线设计的物料平衡计算,以100t/h普通干混砂浆生产线为例,结合当前行业实际情况综合分析原料供应、制备、储存以及成品出料等一系列物料平衡问题
选择不同提取剂对斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白进行制备,优化酸法提取工艺,并对胶原蛋白进行了部分定性研究。实验结果表明,4℃条件下,鮰鱼皮先用0.1MNaOH浸泡6小时再用2.5%NaCl浸泡6小
  本文研究了硅酸盐水泥-铝酸盐水泥-硬石膏三元体系自流平砂浆的力学性能和干燥收缩性能,结果表明:当铝酸盐水泥掺量较小时(0~3%),硬化砂浆的强度随硬石膏掺量的增大逐渐减小
会议
  干混砂浆已经成为了近几年来大力发展的一种建筑材料,由于其有着节能环保和保障施工性能等优点而被广泛应用。目前干混砂浆的包装和散装均是采用气力输送方式,通过内部流化
会议
  基于阿克苏诺贝尔公司独有的甲基乙基羟乙基技术(MEHEC)和改性技术,Bermocoll CCM879纤维素醚在保水性和施工性之间达到最佳平衡,不仅可以提高砂浆与各种基材的粘结强度,
  纤维素醚属于水溶性聚合物,是天然纤维素与醚化剂在一定条件下反应生成一系列产物的总称。从纤维素醚的吸附现象、对水泥浆体初期水化的影响、对熟料矿物初期水化的影响以
  纤维素醚、引气剂是预拌砂浆的重要组成材料,文章研究了纤维素醚的品质及掺量对预拌砂浆湿密度,保水性等性能的影响,同时测试了引气剂及搅拌方式对预拌砂浆湿密度、保水性的
本文通过对荣华二采区10
  可再分散乳胶粉是一种粉状热塑性树脂,它对修补砂浆的和易性、力学性能都有良好的改善效果,但是如果掺量过大,经济性很差;掺量过小,则达不到效果。本文针对市场上常见的多种可