构树黄酮分离鉴定及木犀草素硒配合物的合成研究

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黄酮化合物是构树(Broussonetia papyrifera)中的重要活性物质,其具有多种药理作用,可以与金属元素和微量元素形成配合物,不仅可以改变黄酮类物质的理化性质,还能促进人体对微量元素的吸收。从构树中分离黄酮类化合物,实现对构树有效的资源化利用;利用黄酮化合物与硒元素合成黄酮硒配合物,扩展黄酮化合物的应用范围,为合成有机硒提供理论和技术参考,有助于黄酮化合物药用研究的推广及广泛应用。本论文对构树叶中的构树黄酮进行了绿色提取;进一步提高构树黄酮的纯度。选用构树黄酮含有的木犀草素制备木犀草素硒配合物并进行生物活性研究。研究结果如下:(1)采用超声波辅助提取法从构树叶中提取黄酮类化合物,考察乙醇浓度、料液比和超声时间对构树黄酮提取率的影响,并采用响应面法(RSM)优化构树黄酮提取条件。结果显示:当乙醇浓度为69%、料液比为1:52 g/m L、超声时间为37 min时,构树黄酮提取率最大为37.946 mg/g。采用自由基清除实验研究构树黄酮的抗氧化活性,构树黄酮对DPPH和ABTS的清除率为别为73.03%、99.54%,说明构树黄酮具有良好的抗氧化性。(2)采用金属络合法纯化构树黄酮,基于选定构树黄酮络合最适的金属盐,重点讨论金属盐溶液质量浓度、p H、络合反应时间和构树黄酮浓度对金属络合法分离纯化构树黄酮的影响,采用L9(3~4)正交设计优化工艺条件。结果显示:乙酸钙为金属络合纯化构树黄酮的理想络合金属盐,当乙酸钙溶液质量浓度为10 mg/m L、样液p H为10.5、络合时间为10 min、构树粗提液黄酮浓度为0.45 mg/m L时,构树黄酮金属络合转化率可达89.93%。用0.3 g的EDTA作为解络剂时,构树黄酮金属络合物解离率达83.2%,经过纯化后构树黄酮纯度提高了4.06倍。采用超高压液相色谱-串联质谱技术分析纯化后的构树黄酮,从中检测出六种黄酮化合物,分别为野黄岑苷、黄岑苷、异牡荆黄素、槲皮苷、木犀草素、芹菜素。(3)用木犀草素与二氧化硒在酸催化下制备了木犀草素硒配合物,并对其进行扫描电镜、红外分析、质谱分析、核磁分析和热重分析。木犀草素与硒元素在酸性条件下发生了配位反应,形成了稳定的硒配合物,合成的配合物含有两个木犀草素分子和一个硒氧基团,硒氧基团连接两个木犀草素的第六位碳。研究了木犀草素硒配合物的抗氧化性和抑菌性,当硒配合物浓度为3 mg/m L时对DPPH自由基清除率为91.1%;当木犀草素硒配合物的浓度为5 mg/m L时,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈分别为10 mm和6 mm,说明木犀草素硒配合物具有良好的抗氧化性和抑菌性。
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