松乳菇提取物和化合物GA-Na抗菌活性研究

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本实验通过对松乳菇(Lactarius deliciosus)子实体甲醇浸膏萃取、硅胶柱层析、凝胶柱层析等一系列方法进行分离纯化,并用核磁共振仪、质谱仪以及紫外、红外扫描仪等波谱技术,结合查阅相关文献,鉴定分离出的一个化合物为麦角甾醇过氧化物(ergosterolperoxide)。但通过对其进行抑菌活性实验,发现麦角甾醇过氧化物对小麦赤霉菌、油菜菌核菌等植物病原真菌抑菌效果不佳。因此,麦角甾醇过氧化物不是松乳菇抗植物病原真菌活性的主要成分,松乳菇抗菌成分可能为其他成分,对松乳菇的抗菌活性成分尚需进一步研究。本论文还对从三裂叶蟛蜞菊(Wedalia trilobata)中分离出的二萜化合物grandiflorenic acid与NaOH反应得到其钠盐(GA-Na),采用菌丝生长速率法测定GA-Na对常用19种植物病原真菌的抑制作用。结果表明GA-Na浓度为500μg/mL时,总抑制率在19.3%-98%之间,对其中15种病原菌的抑菌率在50%以上。GA-Na对19种植物病原真菌的抑菌活性随着浓度的降低呈现减弱的趋势。通过与市售农药多菌灵的对比试验表明,GA-Na对花生黑斑菌、茄子绵疫菌、葡萄柄孢菌、茄子茎枯菌、花生褐斑菌、番茄早疫菌、烟草蛇眼菌、玉米圆斑菌、牡丹炭疽菌、柑橘炭疽菌的抑菌活性更强,对油菜菌核菌、西瓜炭疽菌、烟草低头黑的抑菌活性与多菌灵相当,而对小麦赤霉菌、玉米穗腐菌、板栗炭疽菌、苹果炭疽菌、葡萄炭疽菌、茶炭疽六种植物病原真菌的抑菌活性弱。因此,GA-Na具有较广谱、较强的抗植物病原真菌活性。在上述研究基础上,本实验以小麦赤霉菌(Fusarium graminearum)为模式菌,研究GA-Na的抗真菌作用机制。试验结果表明:(1)GA-Na造成菌丝分支减少,分隔减少;(2)GA-Na会破坏病原真菌菌丝体细胞膜的完整性,使细胞内物质大量外渗,电导率增加;(3)GA-Na影响病原真菌菌丝体正常吸收利用还原糖和蛋白质;(4)GA-Na对病原真菌氧化还原系统造成了一定程度的破坏,影响菌体的生物合成,最终导致菌丝体的死亡。鉴于GA-Na具有较强的抗植物病原真菌活性,可以为植物源杀菌剂的开发提供理论基础,具有一定的现实指导意义。
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