【摘 要】
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目的掌握前列腺癌动物模型的构建方法,探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)与前列腺癌之间趋向转移的特性。方法应用人前列腺癌细胞株PC-3 异种皮下种植建立前列腺癌SCID 鼠模型,
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目的掌握前列腺癌动物模型的构建方法,探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)与前列腺癌之间趋向转移的特性。方法应用人前列腺癌细胞株PC-3 异种皮下种植建立前列腺癌SCID 鼠模型,通过密度梯度离心法分离、培养hMSCs,将体外DAPI标记的4～6代hMSCs经尾静脉(15～20 天内共5 次hMSCs,细胞数106/次)和肿瘤周围(共1 次,细胞数10~6/次)注射入荷瘤SCID 鼠体内,分别在经尾静脉注射后17d 和肿瘤周围注射后7d、10d、14d 处死小鼠,将肿瘤和肝、肺、脾、肾等脏器作冰冻切片和石蜡切片,在荧光显微镜下观察肿瘤及各脏器中hMSCs 的分布情况。应用免疫组化技术检测前列腺癌组织中PSA 和PSMA 的表达。利用低熔点的琼脂糖构建体外二维细胞共同培养体系,并接种hMSCs 和PC-3 细胞,观察hMSCs和PC-3 细胞之间的粘附迁移特性。结果(1)前列腺癌SCID 鼠模型成瘤率83.3%,经病理学证实为均为恶性组织,免疫组化技术未检测出肿瘤组织中PSA 和PSMA 的阳性表达。(2)经尾静脉注射DAPI 标记的hMSCs 后17d 和肿瘤周围注射DAPI 标记的hMSCs 后7d、10d、14d,荧光显微镜下显示,前列腺癌组织石蜡切片和冰冻切片中均可见DAPI 标记的hMSCs 的核呈蓝色荧光,而肝、肺、脾、肾等脏器的切片中均未见hMSCs 的存在。(3)经尾静脉注射hMSCs 后2～4d,与对照组相比,可见肿瘤生长速度加快。(4)体外实验表明,hMSCs 和PC-3 细胞共同培养后1d,PC-3 细胞向hMSCs粘附迁移,以后PC-3 细胞向hMSCs 迁移的细胞数逐渐增加,4～7d 后hMSCs 侧见大量的PC-3 细胞聚集,可见细胞集落形成,而PC-3 细胞
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