猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的对养猪业危害严重的传染病。我国通过兔化弱毒疫苗的使用有效地控制了猪瘟的流行,然而非典型猪瘟的出现使得猪瘟的防控形势依然严峻。非典型猪瘟造成猪群的持续带毒排毒,但外表健康,这种持续性感染是造成我国猪瘟仍然发生的一个重要原因。在这个过程中,CSFV与宿主细胞的长期共存是CSFV能够持续性感染的主要原因之一,一方面CSFV利用宿主的物质来进行自身的组装,另一方面通过诱导调控宿主的相关反应,来创造利于自身增殖的细胞微环境,从而达到免疫逃逸的结果。因此,研究CSFV免疫逃逸的相关机制,有助于了解CSFV持续性感染的原因,为猪瘟的防控提供科学依据,而肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor-associated factors,TRAF)作为天然免疫通路中的重要分子,在多个免疫通路中发挥着重要作用。本文研究了CSFV NS3蛋白与TRAF5蛋白之间的相互作用,进而探究了TRAF5对CSFV增殖的影响,获得了以下结果。(1)证实CSFV NS3蛋白与宿主TRAF5蛋白之间存在直接的相互作用。成功构建TRAF5基因和CSFV NS3基因的相关表达载体,通过外源性和内源性Co-IP试验,都检测到细胞内的TRAF5-NS3蛋白复合体,通过GST-Pulldown试验,在体外检测到TRAF5-NS3复合体,同时,通过激光共聚焦试验,观察到TRAF5蛋白与CSFV NS3蛋白在PAM细胞中存在共定位现象。(2)证明TRAF5通过诱导IL-10的表达促进CSFV的增殖。成功构建TRAF5过表达稳转细胞系和TRAF5 shRNA干扰稳转细胞系,通过RT-qPCR和Western blot检测发现,TRAF5过表达细胞系中CSFV的增殖能力显著增强,而在TRAF5干扰细胞系中,CSFV的增殖受到明显的抑制;在随后对细胞因子的检测中发现,TRAF5过表达细胞系中IL-10表达量显著升高,而在干扰细胞系中却被明显抑制;在接种CSFV后,TRAF5过表达细胞系中IL-10被进一步上调,而在干扰细胞系中,IL-10的表达依然受到了明显抑制。综上所述,本研究证实了CSFV NS3蛋白能够与TRAF5蛋白发生相互作用,并且发现TRAF5通过诱导IL-10的表达促进CSFV的增殖。