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目的研究SERPINB1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达情况,初步分析SERPINB1异常表达与HCC发生发展的关系,旨在能够进一步揭示HCC的分子发病机制,为其治疗提供新的靶点。方法1.为了研究SERPINB1在HCC中组织学水平的表达,本研究通过western blot技术检测8例HCC及癌旁新鲜冰冻组织中SERPINB1的表达情况;采用免疫组化方法检测67例HCC及癌旁组织石蜡切片中SERPINB1的表达情况,并结合HCC临床病理资料分析SERPINB1与HCC患者的年龄、性别、肿瘤分级和转移以及血清AFP等因素之间的关系,并对其进行随访,对随访结果应用Kaplan-Meier法分析HCC患者生存率,以及单因素和Cox危险比例模型多因素分析SERPINB1与HCC预后的关系。2.为了研究SERPINB1在HCC细胞学水平的表达,本研究通过采用正常肝细胞LO2及HCC细胞中用western blot技术检测SERPINB1的表达情况;对HCC细胞株HuH7及BEL-7404进行SERPINB1的转染小干扰,用划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,用CCK8检测细胞增殖活性,用western blot技术检测活化的MMP-2的表达情况。明确SERPINB1对HCC的迁移和侵袭的影响。结果1.免疫组化及western blot分析显示,SERPINB1在HCC组织中的表达明显低于对应的HCC癌旁组织, SERPINB1的表达强度与HCC转移(p=0.000)和侵袭(p=0.006)之间的关系有统计学意义。 Kaplan-Meier分析显示SERPINB1在HCC中的低表达与患者总生存率的降低显著相关(p=0.001)。单因素分析表明SERPINB1与HCC病人的不良预后有关(p=0.002)。Cox危险比例模型分析显示SERPINB1可做为HCC预后的独立指标(p=0.023)。2.应用western blot分析显示在正常肝细胞LO2及HCC细胞株中SERPINB1的表达情况,在HCC细胞中表达水平要低于正常肝细胞LO2中的表达水平。对SERPINB1表达相对高的HuH7和BEL-7404进行了SERPINB1转染小干扰后,发现SERPINB1能够抑制HuH7及BEL-7404细胞的迁移和侵袭,但是不影响细胞的增殖活性。在转染了si-SERPINB1的细胞中活化的MMP-2表达水平明显升高。结论1. SERPINB1在HCC中低表达,并且可作为HCC患者独立的预后指标,提示SERPINB1可能与HCC的发生发展相关。2.在HCC细胞株HuH7和BEL-7404细胞的迁移及侵袭过程中,SERPINB1在其中发挥作用可能是通过介导MMPs活化进行的。