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背景肠杆菌科细菌是社区获得性感染和院内感染的重要病原菌,尤其是大肠埃希菌,检出率仍然高居主要细菌首位。近年来由于抗菌药物的大量及不合理使用,使得耐药菌株迅速出现并不断扩散。目前临床肠杆菌科细菌耐药十分普遍,并已经成为一个全球性的问题。其不仅影响抗菌药物的治疗效果、缩短新药的应用与研发周期,更增加患者治疗费用及住院时间,直接威胁人类健康。碳青霉烯类药物,如亚胺培南、美罗培南,具有良好的通透性和光谱抗菌活性,尤其对产超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的革兰阴性杆菌具有良好的活性。但是随着碳青霉烯类抗菌药物在临床的广泛应用,耐药株首先在鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中出现,近几年在肠杆菌科细菌中也开始出现,大肠埃希菌较少有报道。本研究主要是回顾性调查ICU病房革兰阴性菌种肠杆菌的感染情况及探讨临床分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类药物耐药的相关机制。目的对感染主要肠杆菌的ICU患者的临床特征、危险因素及细菌的耐药性进行回顾性调查和研究分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类药物耐药的相关机制。方法1.对2003年～2008年入住ICU病房且细菌培养结果阳性的病例进行回顾性的调查。2.收集2009年ICU病房分离的大肠埃希菌菌株,用琼脂扩散法和琼脂稀释法进行抗菌药物敏感性试验。3.用三维酶抑制试验和EDTA-Na2协同试验分析水解β-内酰胺酶类药物的耐药酶的性质。4.对耐药菌株进行特异性PCR扩增、DNA测序等技术检测介导耐碳青霉烯类药物耐药的基因型。5.用结合试验检测耐药质粒的可传递性。结果1.从87例患者中共分离出139株细菌,其中大肠埃希菌为66.2%,肺炎克雷伯菌为19.4%,阴沟肠杆菌为14.4%。药物敏感试验结果表明,大肠埃希菌对环丙沙星耐药最严重为82.6%,肺炎克雷伯菌对复方新诺明的耐药率最高为60.3%,阴沟肠杆菌对头孢菌素的耐药率达到75%以上。大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为60.9%和48.1%。多因素分析显示复数菌感染与入院前抗菌药物的应用和入院后免疫抑制剂的使用有关(X2=5.369,P<0.05；X2=5.293,P<0.05),细菌的多重耐药与经验用药特别是喹诺酮类的使用有直接关系(X2=3.893,P<0.05)。2.对碳青霉烯类耐药大肠埃希菌对所检测的β-内酰胺酶类药物(包括青霉素类、头孢菌素类、单坏p-内酰胺类、碳青霉烯类和p-内酰胺/酶抑制剂复合制剂)广泛耐药。3.头孢西丁三维试验和EDTA-Na2协同试验分析显示分离的一株大肠埃希菌产生分解碳青霉烯类药物的水解酶。4.PCR扩增、DNA测序证实一株大肠埃希菌携带IMP-4型金属酶(MBL)5.大肠埃希菌质粒转化试验证实IMP-4基因可以把对亚胺培南的耐药性传递给受体菌,证实该耐药性具有可传递性。结论细菌耐药性居高不下,复数菌感染与抗菌药的应用和免疫抑制剂的使用有关,应加强ICU病房细菌耐药性监测,根据药敏结果合理选用抗菌药物。此次研究中IMP-4基因所编码碳青霉烯酶是引起大肠埃希菌对耐碳青霉烯类药物耐药的主要原因,而且此耐药基因可通过质粒水平传播。