植物根尖干细胞再生的机理研究

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拟南芥根尖干细胞微环境(SCN)在植物生长和器官发生的过程中扮演着非常重要的角色。静止中心(QC)对周围干细胞特性的维持以及干细胞微环境的稳定具有非常重要的调控作用。当在QC中大量合成胼胝质阻断与周围干细胞的共质体途径交流后,SCN会发生一系列的变化,如各个组织细胞的分裂能力增强,小柱干细胞和QC发生分化,根冠细胞排列出现紊乱等现象。QC细胞的分化标志着SCN失去原有的功能。但是为了维持正常发育,拟南芥根部需要重新形成一个新的SCN。然而当恢复细胞间的信号交流途径时,根尖干细胞是如何再生的,究竟有哪些因素在发挥作用,对此的研究仍然较少。本研究通过阻断QC细胞与周围细胞的共质体途径交流,使SCN失去原有的结构和功能。利用此系统,我们利用显微镜的观察研究了当恢复至正常生长条件下时,拟南芥根尖干细胞再生过程中各种现象的变化,并对植物根尖干细胞再生的机理进行初步的探讨。通过一系列的表型分析,我们发现当恢复至正常生长条件时,胼胝质的降解是非常迅速的,同时也说明在极短的时间内细胞间的信号通讯就能够得到恢复。通过观察表型及pWOX5:erGFP等其它报告基因的变化,我们发现形态学的QC的建成是早于功能学意义的QC。通过观察了在重建的过程中各个组织特异性表达基因的变化,发现早期生长素浓度的富集导致维管束细胞的分裂能力增强,但在后期其分裂能力逐渐减弱,而内皮层的分裂能力逐渐加强。这个现象说明在重建的过程中各个组织细胞的分裂对SCN重建的贡献是不一样的。通过观察生长素和细胞分裂素在同一条根中不同时间点的相对分布变化,我们发现在诱导的过程中生长素的分布区域先是缩小至SCN区域,然后再慢慢地向根冠部分延伸,在这个过程中细胞分裂素的含量似乎在生长素出现的部位逐渐减少,从而在根尖形成互补的局面,表现相互拮抗的现象。在干细胞再生的过程中生长素的分布逐渐恢复至正常情况下的分布,而细胞分裂素与生长素分布出现慢慢重叠的现象,随后恢复至正常的分布模式,说明了生长素和细胞分裂素在SCN再生过程中的相互作用。本研究展现了在完整的拟南芥根中SCN再生的实时观察过程。
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