STIM1在胃癌中的表达及功能研究

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STIM1是一种内质网膜上的跨膜蛋白,它能调节细胞内钙离子浓度,维持钙离子稳态。细胞内钙离子通过不同信号通路在多个环节影响着肿瘤的分化、增殖、凋亡、迁移等STIM1是细胞内关键的钙离子感受器,它与肿瘤的关系受到广泛关注。文献报道,STIM1在多种肿瘤细胞中表达,如乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌等。目前,尚未见STIM1与胃癌有关的报道,且关于STIM1对肿瘤细胞生物学行为影响的观点存在较大分歧。目的本课题以胃癌为研究对象,探究STIM1在胃癌中的表达,STIM1对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响,并初步探讨其机制。方法(1)Western Blot检测MKN45、SGC7901、AGS、NCI-N87四种胃癌细胞株中STIM1表达情况。(2)si RNA干扰下调胃癌细胞中STIM1表达,Western Blot与实时荧光定量PCR检测干扰效率。(3)CCK8检测细胞增殖。(4)Annexin V-FITC/PI双染流式检测细胞凋亡。(5)细胞粘附实验、Transwell和细胞划痕实验检测STIM1对胃癌细胞粘附、迁移、侵袭能力的影响。(6)Western Blot检测STIM1功能与MAPK信号通路的关系。(7)免疫组化方法检测胃癌中肿瘤血管内皮内STIM1的表达。(8)免疫组织化学和Western Blot的方法检测胃癌组织中STIM1的表达情况,分析STIM1表达与胃癌临床分期、浸润深度、分化程度的关系。结果(1)四种胃癌细胞株均有STIM1的表达,SGC7901,MKN45表达量较高,NCI-N87最低。(2)STIM1 si RNA下调胃癌细胞中STIM1蛋白与基因表达。(3)STIM1 si RNA干扰后MKN45和SGC7901细胞增殖能力相较对照组无明显变化。(4)STIM1不直接影响胃癌细胞凋亡。(5)STIM1-si RNA促进胃癌细胞粘附,抑制细胞的迁移侵袭。(6)STIM1下调后,胃癌细胞中MEK、ERK、p-MEK、p-ERK蛋白表达几乎无影响。(7)肿瘤血管内皮细胞存在STIM1的表达。(8)STIM1在胃癌组织阳性率高于正常胃组织。结论STIM1在胃癌细胞和组织中均表达,癌组织表达量和表达率均高于正常胃组织。STIM1亦表达于肿瘤血管内皮细胞。STIM1对胃癌细胞株增殖、凋亡能力无明显作用,有促进肿瘤细胞的迁移侵袭的作用,但目前此作用的信号通路尚不清楚。
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